MTBE对小鼠脑组织的毒作用及机制研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:woodcock999
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目的:探讨甲基叔丁基醚(Methyl Tertiary Butyl Ether, MTBE)对孕鼠及其胎鼠脑组织的毒作用及分子机制。方法:选用健康成年昆明种孕鼠40只随机分为空白对照组和MTBE四个实验组,每组8只孕鼠。以检出阴栓当天为孕0天,从怀孕第0天开始,给孕鼠以不同剂量的MTBE经口灌胃染毒,实验组MTBE染毒剂量为25, 100, 400, 800mg/kg.bw,每天一次,直到胎鼠出生。观察胎鼠一般生长发育情况,然后断头处死,取出脑组织备用。应用免疫组织化学方法观察胎鼠大脑皮质、海马和小脑皮质nNOS及神经递质Glu的分布和变化;分光光度法检测胎鼠脑组织中Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶、SOD、GSH活性及LDH、MDA含量的改变;HE染色和Nissl染色观察MTBE对孕鼠和胎鼠大脑皮质、海马和小脑皮质神经细胞形态结构改变;透射电镜下观察孕鼠和胎鼠小脑皮质神经细胞超微结构的变化。结果1、妊娠期母鼠接触MTBE浓度为400、800mg/kg.bw时,胎鼠大脑皮层、小脑皮层和海马nNOS和神经递质Glu的表达随着染毒剂量增加而减少(P<0.05)。其中以大脑皮质改变最为明显。2、妊娠期母鼠接触高剂量MTBE对胎鼠脑组织ATP酶活性可产生明显的抑制作用,当MTBE染毒剂量增加到400、800mg/kg.bw时,胎鼠脑组织中Na+, K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase活性明显降低,与对照组比较差异有显著性(P < 0.05)。3、随着妊娠期母鼠接触MTBE剂量的增加,胎鼠脑组织中LDH含量呈现逐渐升高的趋势,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。4、妊娠期母鼠接触不同剂量的MTBE后,胎鼠脑组织中MDA、SOD、GSH测定结果表明:随着孕鼠MTBE染毒剂量的增加,胎鼠脑组织中MDA含量升高,GSH含量及SOD活性逐渐降低,100、400mg/kg.bw MTBE组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),呈现一定的剂量-效应关系。5、孕鼠接触MTBE,孕鼠和胎鼠脑组织切片HE染色和Nissl染色光镜下其大脑皮质、小脑皮质和海马神经细胞形态结构未见明显改变。但通过8000倍透射电镜观察,可见孕鼠和胎鼠小脑皮质神经细胞超微结构出现损伤作用,表现为神经细胞膜皱缩,神经细胞水肿变性,胶质细胞增生,胞浆内线粒体结构模糊或肿胀、嵴丢失呈空泡样变,内质网扩张等。结论1、妊娠期母鼠接触MTBE可对胎鼠及母鼠自身脑组织产生一定的损伤作用。2、MTBE可透过胎盘屏障和血脑屏障,通过氧化损伤机制,损伤胎鼠脑组织神经细胞的超微结构,降低其ATP酶的活性,从而影响神经细胞的能量代谢障碍及细胞膜通透性增加。3、MTBE可导致胎鼠脑组织内nNOS活性降低和神经递质Glu含量减少,从而对中枢神经系统产生抑制作用。
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