本研究以雀鲷科(Pomacentridae)鱼类中双锯鱼属(Amphiprion)和棘颊雀鲷属(Premnas)鱼类为研究对象,对这两种属中的代表性鱼类的胚胎发育和体色形成机制进行探讨。分别从胚胎发育的比较、色素细胞组成、光色处理后色素细胞变化和相关色素基因的表达差异等方面,以二代转录组测序为辅助分析手段,进行了相关方面的研究,以期为观赏鱼人工繁育养殖提供理论支持,期望为体色研究提供新材料,为现有的体色形成相关机制提供重要的理论补充。1、双锯鱼属(Amphiprion)四种鱼种比较胚胎学研究和进化探讨在严格控制水温和盐度条件下,对白条双锯鱼(Amphiprion frenatus)野生鱼、眼斑双锯鱼(A.ocellaris)野生鱼、海葵双锯鱼(A.percula)选育种和眼斑双锯鱼(A.ocellaris)选育种的胚胎发育进行观察比较。结果表明,所有双锯鱼几乎均稳定在一个月产卵两次,在相同的生长环境中,不同种类双锯鱼产卵时间差异较小,产卵间隔规律性较强;但胚胎发育时间有较大差别,海葵双锯鱼的选育种胚胎发育时间最长,眼斑双锯鱼的选育种最短。四种双锯鱼有着相同的胚胎发育学特征和孵化期,但胚胎发育时间不同,分别为244h、240h、260h、181h;其中卵裂期到神经胚期的发育时间差小于2h,翻转期至孵化期决定了胚胎发育时间。研究发现,不同双锯鱼胚胎发育时间可能与进化距离有关,且温度、光照周期以及卵质量与形态对其胚胎发育时间有较大影响。人工选育眼斑双锯鱼的胚胎发育时间最短,与野生眼斑双锯鱼差异明显。2、雀鲷科(Pomacentridae)五种鱼种色素细胞观察和统计本文对五种雀鲷科(Pomacentridae)鱼类的鳞片、皮肤和鳍的色素细胞进行观察。五种鱼种分别是双锯鱼属(Amphiprion)的番茄小丑鱼,人工繁育的普通公子小丑鱼,橙色野生公子小丑鱼,突变的黑公子小丑鱼和棘颊雀鲷属(Premnas)的透红小丑鱼。这五种小丑鱼的鳞片薄而透明,呈齿状圆形,在显微镜下,能直接观察到色素细胞,镶嵌在皮肤内的鳞片前区呈无色透明,裸露在外未被覆盖的后区有色素细胞。番茄小丑鱼、人工繁育的普通公子小丑鱼、透红小丑鱼的鳞片均由四种色素细胞组成:黑色素细胞,红色素细胞,黄色素细胞和虹彩色素细胞;白色条纹区域的鳞片由两种色素细胞组成:黑色素细胞和虹彩色素细胞。背部皮肤色素细胞由三种色素细胞组成:黑色素细胞,红色素细胞,黄色素细胞。白色条纹处皮肤由两种色素细胞组成:黑色素细胞和白色素细胞。鳍的色素细胞组成与背部皮肤色素细胞组成一致,但黑色素细胞含量明显比皮肤区域少。野外捕捞的橙色野生公子小丑鱼(未经人工饲养)鳞片、体侧皮肤、鳍条均没有黑色素细胞,白色条纹部位有少量黑色素细胞。野外突变的黑公子小丑鱼体侧鳞片只有两种色素细胞:黑色素细胞和虹彩色素细胞。背部皮肤有黑色素细胞和隐藏在黑色素细胞里的黄色素细胞,白色条纹区域含有黑色素细胞和虹彩色素细胞,鱼鳍只有一种黑色素细胞组成。所有小丑鱼鳍条中不含有虹彩细胞。3、不同光色对白条双锯鱼(Amphiprion frenatus)体色的影响以白条双锯鱼为研究对象,用白光、红光和蓝光对其进行照射,白光为对照组,红光和蓝光为实验组,观察不同光色对白条双锯鱼体色的变化,依靠二代转录组测序技术从宏观生理到微观分子系统探讨了不同光色照射下白条双锯鱼体色变化机制。结果显示,蓝光照射下的白条双锯鱼体色明显要比红光照射和白光照射下的白条双锯鱼体色更黑,而红光照射下的白条双锯鱼红色更深,白光照射下的白条双锯鱼,颜色并没有肉眼可见的明显变化。从转录组测序结果中筛选出8个显著性差异基因,分别是aim1、dct、oca2、shady、slc24a5、tyr、tyrp1、mitf,这8个基因中除shady基因,剩余的均是与黑色素相关的基因,在蓝光中均出现表达量升高的趋势。因此,不同光色对黑色素细胞相关基因表达量影响最大,对其他色素细胞相关基因产生的影响较弱,黑色素细胞的迁移和发育会对其他种类的色素细胞发育产生影响。