【摘 要】
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天然植物饮料是多酚等生物活性物质的重要膳食来源。茶（Camellia sinensis）叶及湖北海棠（Malus hupehensis）叶为我国常见的茶饮和代茶饮,本文以茶叶加工过程中产生的茶末和湖北海棠叶为原料,研究了多酚等活性成分的提取和纯化工艺,并对提取物的化学成分进行了鉴定,同时还考察了茶末和湖北海棠叶不同极性提取物抗氧化、降血糖、降血脂等生物活性,以期为相关产品精加工和应用提供理论依据。
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天然植物饮料是多酚等生物活性物质的重要膳食来源。茶（Camellia sinensis）叶及湖北海棠（Malus hupehensis）叶为我国常见的茶饮和代茶饮,本文以茶叶加工过程中产生的茶末和湖北海棠叶为原料,研究了多酚等活性成分的提取和纯化工艺,并对提取物的化学成分进行了鉴定,同时还考察了茶末和湖北海棠叶不同极性提取物抗氧化、降血糖、降血脂等生物活性,以期为相关产品精加工和应用提供理论依据。具体结论如下:（1）采用逆流萃取法一步浸提茶末中茶多酚、茶氨酸和茶多糖类三种活性成分:通过浸提剂筛选以及浸提级数筛选,确定乙醇溶液为浸提剂进行三级逆流萃取;通过单因素试验确定最优浸提条件,提取茶多酚最佳浸提工艺为:料液比1:20（g/m L）,提取温度85°C,乙醇浓度为60%,提取时间60 min,茶多酚实际提取率为31.35%,提取物中茶氨酸干态物质百分比为3.68%、茶多糖提取率为12.25%,证实了优化工艺的有效性。（2）采用液液萃取与树脂吸附相结合的工艺对茶末提取物进行纯化:提取物经乙酸乙酯萃取,分离出茶多酚;应用732阳离子交换树脂分离水相中的茶氨酸与茶多糖,当树脂前处理p H=2.0时,茶多糖保留率为87.81%,茶氨酸吸附率为75.89%;使用p H=8.0的磷酸缓冲溶液洗脱茶氨酸,洗脱率为96.47%。经筛选应用聚酰胺树脂纯化茶多酚,通过单因素试验确定优最佳纯化工艺为洗脱液体积75 BV、洗脱液p H=8、洗脱液为80%乙醇,此条件下茶多酚洗脱率为88.21%,茶多酚纯度为75.03%。（3）考察茶末和湖北海棠叶中不同极性萃取物的体外抗氧化活性、胰脂肪酶抑制率、α-淀粉酶抑制率、体外模拟消化中多酚释放率及对于Hep G-2细胞增殖抑制率等生理活性。结果表明,不同有机物萃取相均可有效清除DPPH、ABTS自由基,具有较强的抗氧化活性,且EAF（乙酸乙酯萃取相）抗氧化活性显著高于其他组分;相同浓度下,HTEAF（湖北海棠叶多酚乙酸乙酯萃取相）具有最高的胰脂肪酶抑制率(IC50=0.03 mg/m L),其次是CEAF（茶多酚乙酸乙酯萃取相）,IC50=0.89 mg/m L;相同浓度下,HTEAF的α-淀粉酶抑制率最高(IC50=0.22 mg/m L),其次是CEAF(IC50=1.29 mg/m L);体外模拟消化试验表明,90 min模拟胃消化试验中海棠叶多酚的最大浓度59.28 mg/m L为胃消化5 min（28.51 mg/m L）的2.08倍,是盐酸最大释出量（42.59 mg/m L）的1.39倍。90 min模拟胃消化试验中茶多酚的最大浓度54.71 mg/m L为胃消化5 min（27.18 mg/m L）的2.02倍,是盐酸最大释出量37.18 mg/m L的1.47倍;HTEAF和CEAF均对Hep G-2细胞具有明显的抗增殖作用,其中HTEAF作用敏感度较强,在低浓度下可发挥作用,CEAF在浓度达到1 mg/m L时开始具有明显的抗增殖作用,在8 mg/m L时抗增殖抑制率可达到91.60%。（4）通过HPLC-MS分析,从HTEAF中共鉴定出33种化合物,从CEAF中共鉴定出16种化合物,并对其中7种含量较高化合物进行定量分析。
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