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研究目的： 1 建立一种从成人骨髓中分离和扩增间充质干细胞(MSC)的方法，并从细胞形态、抗原表达、超微结构、体外分化能力、增殖方式和细胞周期等方面研究其生物学特性，并对其加以鉴定。 2 探讨MSC在体外对脐血CD34~+细胞增殖的促进作用和黏附分子表达的影响。 3 探讨MSC在体外对淋巴细胞增殖的抑制作用。 研究方法： 1 采用密度梯度离心法和直接贴壁法从正常人骨髓、脐血(CB)和外周血中分离扩增MSC，通过细胞形态、免疫表型、向成骨细胞及脂肪细胞分化能力、超微结构和细胞周期等方面对其鉴定。 2 将CB CD34~+细胞接种于IMDM培养基，将融合达80％的MSC用137Cs照射15Gy后作为滋养层支持CD34~+细胞扩增，加入SCF、FL、TPO、IL-3等细胞因子，比较不同培养条件对造血细胞增殖能力、集落形成能力及黏附分子表达的影响。 3 将不同数量的MSC加入异基因混合淋巴细胞反应体系中，用3~H标记的脱氧胸腺嘧啶核苷酸检测MSC对加入异基因混合淋巴细胞反应的抑制作用。用PHA刺激CD4~+细胞增殖，同时加入MSC，用流式细胞仪检测分析CD4~+CD25~+比例的变化。 研究结果： 1 从12份骨髓标本中均可分离获得MSC，而从3份外周血和5份CB脐血标本中未能获得形态均一的MSC。处于对数生长期的MSC中，只有约10％细胞处于增殖期，而绝大部分处于G0／G1期，未分化的MSC表达Thy-1、SH2、SH3、SB10、CD44、CD13、CD49e和CD29，不表达CD34、CD45、HLA-DR、CD14和CD31，经过诱导可以向成骨细胞和脂肪细胞分化；MSC在体外培养中分为两群，成纤维样的