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目的:1.观察单侧肾切除术后肾脏代偿性肥大的病理和蛋白质水平的改变,初步探讨线粒体在肾脏代偿性肥大中的作用。2.观察UCP2(-/-)小鼠单侧肾切除术肾脏代偿性肥大的病理和蛋白质水平的改变,并且与野生型小鼠进行比较。以系膜细胞和足细胞为实验对象,探讨UCP2的可能作用及作用机制。3.观察UCP2在肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)过程中作用的同时,在microRNA水平对UCP2的作用机制进一步探讨。方法:分别以C57BL/6J小鼠和UCP2(-/-)小鼠为研究对象,采用单侧肾切除术建立肾脏代偿性肥大动物模型。试验中动物分组为假手术组(sham)和手术组。分别于术后1天、3天、7天、14天以及3个月采集肾组织标本,HE病理观察肾小球肥大以及足突的改变,westernblot法分析尿白蛋白和线粒体蛋白质的变化;同时以系膜细胞和足细胞作为实验对象,分别转染UCP2 siRNA以及加入genipin,减少UCP2表达的同时观察TGF-β1对系膜细胞和足细胞的作用,分析其可能的机制。Westernblot检测FN,α-SMA,CD2AP,WT1, P60改变。以C57BL/6J小鼠为研究对象,建立UUO肾脏纤维化动物模型,通过microRNA芯片技术筛选变化的microRNA,利用实时定量PCR法验证TGF-β1刺激NRK-52E细胞后miR-30e表达下降。HE、masson三色染色病理和westernblot比较UCP2(-/-)小鼠和野生型小鼠UUO3天和7天肾脏的纤维化。利用UCP2siRNA,miR-30e模拟物和抑制物转染入细胞,观察TGF-β1诱导EMT的改变。结果:1.单侧肾切除术后可以引起对侧肾脏代偿性肥大,肾小球面积增大,足突融合。肾小球系膜区FN和α-SMA表达增加,足细胞CD2AP和WT1表达下降,继而引起尿白蛋白的增加。2.单侧肾切除术后对侧肾脏线粒体蛋白表达增加。3.UCP2(-/-)小鼠单侧肾切除术后对侧肾脏代偿性肥大的变化与野生型小鼠相比明显缓解。肾小球面积减少,足突结构较为完整。肾小球系膜区FN和α-SMA表达下降,,足细胞CD2AP和WT1表达恢复。尿白蛋白排泄减少。4.UCP2(-/-)小鼠单侧肾切除术后对侧肾脏线粒体蛋白表达与野生型小鼠相比明显减少。5.UCP2siRNA转染或者genipin治疗,可以缓解TGF-β1对系膜细胞和足细胞的损害。6.单侧输尿管结扎术可引起肾脏纤维化。UCP2基因敲除小鼠肾脏纤维化程度明显下降。7.UCP2siRNA转染阻断了TGF-β1诱导的NRK-52E细胞EMT的改变。8.miR-30e在小鼠UUO术后表达下降,并且在TGF-β1刺激NRK-52E细胞时表达也下降。9.miR-30e模拟物可以缓解TGF-β1诱导的NRK-52E细胞EMT,而miR-30e抑制物可以明显诱导NRK-52E细胞EMT.。10.UCP2siRNA转染可以阻断miR-30e抑制物诱导的NRK-52E细胞的EMT。结论:1.UCP2参与了肾脏代偿性肥大的过程,UCP2表达下降可以缓解肾脏代偿性肥大,并且进一步缓解尿白蛋白的丢失。2.UCP2参与了肾脏纤维化的过程。UCP2表达下降可以缓解UUO引起的肾脏纤维化的程度以及TGF-β1诱导的NRK-52E细胞EMT过程。而UCP2的作用被miR-30e调节。