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本文以斜带石斑鱼为实验材料,通过在海水鱼饵料中添加一定浓度的甘露寡糖绿色饲料添加剂,饲养八周后,研究其对急性低温(14±1℃)胁迫下的斜带石斑鱼免疫及抗氧化功能和对肠道菌群的影响。急性低温胁迫实验共设置4个实验组:空白对照组(25±1℃)、空白应激组(14±1℃)、甘露寡糖对照组(25±1℃)及甘露寡糖应激组(14±1℃),低温胁迫时间为24h,每3h取一次样。检测一系列与抗氧化免疫相关的生理生化指标,其中包括呼吸爆发、DNA损伤、总抗氧化能力、抗氧化相关酶活性以及抗氧化免疫相关基因表达水平。肠道菌实验共设置2个实验组:空白组和甘露寡糖组。实验结果如下: 1、在急性低温胁迫下,斜带石斑鱼呼吸爆发强度、DNA损伤程度以及体内MDA含量高低的变化存在一致性,三者都会随着低温胁迫时间的延长呈现先升高后降低。在有无低温胁迫情况下,添加一定浓度的甘露寡糖后,斜带石斑鱼呼吸爆发强度、DNA损伤程度以及体内MDA含量都分别明显降低。 2、在急性低温胁迫下,斜带石斑鱼肝组织中的总抗氧化能力(T-AOC)随着应激时间的延长呈现先升高后降低趋势。而肝组织中抗氧化相关酶--SOD和CAT活性却随着应激时间的延长呈现先降低后升高,最后接近于应激前水平的趋势。在有无低温胁迫情况下,添加一定浓度的添加甘露寡糖后,斜带石斑鱼肝组织中的抗氧化能力(T-AOC)和抗氧化相关酶--SOD和CAT的活力都明显增强。 3、在急性低温胁迫下,斜带石斑鱼肝脏组织中抗氧化免疫相关基因--补体C3、P53、脂肪酸结合蛋白(FABP)的表达量在急性低温胁迫下短时间内迅速升高,随后,随着胁迫时间的延长,逐渐下降,最终趋于接近应激前水平。在有无低温胁迫情况下,添加一定浓度的甘露寡糖后,三基因表达量都明显增加。 4、添加一定浓度的甘露寡糖后,斜带石斑鱼肠道中大肠杆菌和溶藻弧菌的数量得到明显降低,一定浓度的甘露寡糖起到优化肠道菌群的结构,提高机体免疫和抗病能力作用。 以上结果表明:在急性低温(14±1℃)胁迫下,短时间内,斜带石斑鱼机体会受到一定的氧化应激伤害,这主要表现为鱼体内活性氧含量过高,大量的活性氧对机体细胞的DNA等大分子物质和细胞膜脂质造成一定的损伤,但随着胁迫时间的延长,斜带石斑鱼体内可通过抗氧化相关的调节机制,尤其是抗氧化防御系统,来清除低温胁迫所产生的过剩活性氧,使机体活性氧水平达到平衡,从而保护机体免受低温胁迫所带来的危害。添加一定浓度的绿色添加剂--甘露寡糖能提高斜带石斑鱼体内抗氧化相关酶的活性和抗氧化免疫相关基因的表达量,不但提高了机体总抗氧化能力,而且还加速了体内自由基的清除,使机体内的活性氧水平迅速达到平衡,从而更好的保护鱼体免受低温胁迫造成的氧化应激所带来的危害。此外,甘露寡糖还明显降低了斜带石斑鱼肠道大肠杆菌和溶藻弧菌的数量,优化了肠道菌群的结构,提高机体免疫和抗病能力,从而提高了斜带石斑鱼养殖的成活率。