血清唾液酸和羟脯氨酸联合检测的方法学建立及初步临床应用

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目的分别检测卵巢癌、结直肠癌患者血清中唾液酸&羟脯氨酸水平,分析其与患者临床病理参数的关系,并与各肿瘤当前最常用检测手段进行比较,从而评价该联合检测指标在卵巢癌、结直肠癌诊断中价值。方法1.待检测样本为临床病人血清,方法为采集空腹研究对象静脉血5mL,3000转离心10分钟,收集血清,尽快检测,如需短期放置应放于4℃冰箱中,长期储存应置于-20℃或-80℃超低温冰箱保存。2.血清唾液酸、羟脯氨酸水平联合检测采用青岛博新生物技术有限公司生产的血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测试剂盒,使用GF-EⅡ比色仪采用分光光度法并严格按照相关说明书进行检测,检测结果>95U/ml定义为阳性。每次检测前进行使用质控品进行质量控制。3. CEA、CA125、HE4的检测采用电化学发光方法检测,使用德国罗氏公司的Cobas e601仪器及配套相关试剂盒按照说明书严格进行,定标与质控均符合实验室相关要求。结果1.结直肠癌组血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平(106.1±10.2)U/ml和CEA(11.9±9.8)检测水平明显高于结直肠腺瘤组、息肉组和健康人群组(P均<0.05)。结直肠癌组血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平和CEA水平阳性率显著高于结直肠腺瘤组、息肉组和健康人群组(P均<0.05)。2.Ⅲ期和Ⅳ期结直肠癌患者唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平和阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期(t=4.876,χ2=9.418,P均<0.05)。肿瘤部位、年龄、性别对血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平无显著影响(P<0.05)。手术治疗后第7天和第10天血清唾液酸羟脯氨酸联合检测水平与治疗前相比明显降低(P均<0.05)而血清CEA水平的改变无明显统计学差异(P>0.05)。3.结直肠癌患者血清唾液酸和羟脯氨酸联合检测水平与血清CEA水平呈显著正相关(r=0.543,P<0.05)。在ROC曲线分析中,唾液酸和羟脯氨酸联合检测诊断结肠癌曲线下面积为0.881,而CEA检测的曲线下面积为0.804,两者相比有显著性差异(P<0.05)。对唾液酸&羟脯氨酸和CEA联合检测,其诊断敏感性为85.2%,显著高于两者单独检测的敏感度(P均<0.05)。4.卵巢癌患者血清唾液酸和羟脯氨酸联合检测水平受到肾衰和妊娠状态显著影响,但不受年龄和绝经状态影响。血清唾液酸和羟脯氨酸联合检测水平、HE4和CA125的中位数结果分别为119.0 U/ml,190.2 pmol/1和366.0 pmol/1,该水平显著高于卵巢良性疾病患者水平(P<0.001)。5.唾液酸和羟脯氨酸联合检测诊断卵巢癌的ROC曲线下面积显著高于HE4和CA125(P<0.001),但与ROMA指数相比,没有显著性差异。另外,48.3%的唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平在手术前诊断为阳性的卵巢癌患者,手术后诊断变为阴性。结论1.血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平在结直肠癌患者中显著升高,并且在体检筛查和动态监测中具有一定价值,其总体诊断价值高于CEA,可能成为临床结直肠癌辅助诊断中的潜在标志物。2.血清唾液酸、羟脯氨酸联合检测水平在卵巢癌患者中显著升高,并且不受年龄和绝经状态的影响。和HE4及CA125相比,血清唾液酸和羟脯氨酸联合检测的诊断价值更大,尤其在盆腔肿块的疗效监测中有较大价值,但与ROMA相比无显著差异。但临床应用中应注意肾衰患者和妊娠期女性的结果分析。
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