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生物药物紫杉醇和阿霉素是临床上肿瘤化疗的重要药物,肿瘤化疗治疗过程中产生对抗肿瘤药物的耐受性是肿瘤化疗治疗失败的重要原因。因此深入了解耐药产生机制是解决化疗耐药的基本。人畸胎瘤衍生生长因子(TDGF1/Cripto1)是干细胞的标志之一,其在正常组织中不表达,但近年来发现TDGF1在人类恶性肿瘤中高表达,且其高表达往往预示着化疗预后差。这为认识肿瘤发生发展提供了新视界。本文以严重影响女性健康的恶性肿瘤卵巢癌细胞株A2780为研究材料,探讨A2780耐药与TDGF1之间的关系及与TDGF1相关的信号通路的激活,以更加深入了解TDGF1在卵巢癌耐药细胞中的作用。首先,本论文对A2780/WT和A2780/PTX细胞对紫杉醇的药敏性进行检测。MTT法所得其对紫杉醇的IC50分别是:23.88μg/m L和240.9μg/m L,二者相差10倍,说明A2780/PTX细胞对紫杉醇具有耐受性;RT-PCR、免疫荧光染色检测TDGF1的表达发现,TDGF1在A2780/PTX细胞中的表达显著高于A2780/WT细胞。TDGF1的高表达通常与细胞增殖相关,因此检测A2780/WT和A2780/PTX细胞的生长曲线和增殖指数表明,A2780/PTX细胞的增殖能力比A2780/WT细胞高。初步证实A2780对紫杉醇耐受与TDGF1高表达相关,且其高表达增强细胞增殖能力。其次,为了进一步证实A2780耐药与TDGF1高表达相关,选择化疗一线用药紫杉醇和阿霉素,通过药物低浓度持续加量诱导法诱导A2780对紫杉醇/阿霉素的耐药细胞。诱导A2780/PTX细胞的过程中获得两株细胞株A2780/PTX1和A2780/PTX2。诱导的A2780/PTX2细胞对紫杉醇的IC50是255.3μg/m L,与野生型细胞相差10倍,表明其对紫杉醇具有耐受性;RT-PCR和免疫荧光检测TDGF1在A2780/PTX系列细胞中的表达发现TDGF1在A2780/PTX系列细胞中高表达;A2780/PTX系列细胞的生长曲线和增殖指数表明A2780/PTX系列细胞的增殖能力强于野生型细胞。同样的结果在A2780/ADM系列细胞中也能得到。进一步证明卵巢癌A2780细胞耐药导致TDGF1高表达。最后,在A2780/PTX细胞中TDGF1的高表达所激活的信号通路是依赖于Noadl1的TGFβ信号通路。RT-PCR检测与TDGF1相关的信号通路基因发现,在A2780/PTX细胞中Nodal1高表达,初步表明TDGF1的高表达激活了与Nodal1相关的信号通路。Western blot结果表明A2780/PTX细胞中Smad3高表达且Smad3发生磷酸化,更加证实TDGF1的高表达激活了Nodal1/Smad3信号通路。本文探讨了卵巢癌A2780细胞耐药与TDGF1高表达的关系,证实了TDGF1参与了卵巢癌A2780的耐药过程,但是其具体参与耐药过程的机制还有待进一步研究。