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研究背景雌激素治疗能有效减少绝经后妇女的骨丢失及骨折发生率,但同时也增加了患乳腺癌和子宫内膜癌的风险。植物雌激素以其潜在的优点,成为研究的热点。大豆苷原是一种常见的植物雌激素,具有广泛的应用前景。已有的研究提示植物雌激素对绝经后骨质疏松症有一定的防治作用,然而也有一些研究结果不尽理想,这可能与植物雌激素对骨质疏松症的作用呈剂量依赖性双相作用有关,但相关研究报道较少;植物雌激素对子宫和乳腺的作用也还没有定论。最近的研究提示雌激素受体（estrogen receptors,ERs）和过氧化物酶增殖子激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptors gamma,PPARγ）可能参予其调节机制,但缺乏动物研究数据,具体作用机制也不清楚。第一部分大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松症的量效作用及其对骨组织ERs和PPARγ表达的影响目的研究不同剂量大豆苷原对去势大鼠骨代谢生化指标、骨密度、生物力学、骨形态学以及对骨组织ERα、ERβ和PPARγmRNA和蛋白表达水平的影响,探讨大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松症的量效作用及其分子机制。方法将4月龄大鼠随机分为6组:假手术组（Sham）、去势组（OVX）、去势+戊酸雌二醇组（E2,戊酸雌二醇800μg/kg·d）、去势+高剂量大豆苷原组（H-Dai,大豆苷原200 mg/kg·d）、去势+中剂量大豆苷原组（M-Dai,大豆苷原50 mg/kg·d）和去势+低剂量大豆苷原组（L-Dai,大豆苷原10 mg/kg·d）,除假手术组外,其余大鼠均切除卵巢,术后4周开始以相应的药物灌胃,3月后处死大鼠。取血清检测E2、Ca、P、ALP和BGP水平;取腰椎骨L1-5和左股骨检测骨密度;取腰椎骨L3和左股骨检测生物力学;取腰椎L4做骨形态分析;以腰椎L6和右股骨提取总RNA,Realtime-RT-PCR方法检测ERα、ERβ和PPARγmRNA表达;免疫组化检测腰椎L4与左股骨ERα、ERβ和PPARγ蛋白表达。结果1、L-Dai组大鼠腰椎BMD、最大压缩载荷、骨小梁与椎体总面积比值,以及股骨BMD和最大三点弯曲载荷均比OVX组显著增高,与E2组无显著性差异;M-Dai组大鼠腰椎BMD、最大压缩载荷、骨小梁与椎体总面积比值以及股骨BMD比OVX组显著提高;H-Dai组大鼠只有腰椎BMD、最大压缩载荷、骨小梁与椎体总面积比值等指标显著高于OVX组。2、M-Dai组大鼠腰椎BMD、骨小梁与椎体总面积比值以及股骨最大三点弯曲载荷等指标都显著低于L-Dai组大鼠;H-Dai组大鼠腰椎BMD、骨小梁与椎体总面积比值,以及股骨BMD和最大三点弯曲载荷均显著低于L-Dai组大鼠。3、Dai三个剂量组大鼠腰椎和股骨ERαmRNA和蛋白表达水平均与OVX组无显著性差异。4、L-Dai和M-Dai组大鼠腰椎和股骨ERβmRNA和蛋白表达水平均显著高于OVX组,但M-Dai组大鼠股骨ERβ蛋白表达水平却显著低于L-Dai组大鼠;H-Dai组大鼠仅腰椎ERβmRNA和蛋白表达水平显著高于OVX组,股骨则与OVX组无显著性差异,且显著低于L-Dai组大鼠。5、Dai三个剂量组大鼠腰椎和股骨PPARγmRNA和蛋白表达水平均显著低于OVX组大鼠,H-Dai组表达水平高于另外两个剂量Dai组,但三组间差异没有显著性。结论1、大豆苷原对骨产生雌激素样作用,对去势大鼠骨质疏松症有防治作用,呈现剂量依赖性关系,低剂量时效果与雌二醇相当,高剂量时效果呈现降低的趋势。2、大鼠腰椎和股骨均表达ERα和ERβ,但以ERβ为主,提示大豆苷原主要通过ERβ对骨产生保护作用。3、大豆苷原低剂量时大鼠腰椎和股骨ERβ表达水平高,随着剂量增加,ERβ表达水平呈下降趋势,而PPARγ表达水平则呈上升趋势,这提示ERβ和PPARγ之间可能存在一种交叉对话的关系,并且参予大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松症量效作用。第二部分大豆苷原对去势大鼠子宫内膜的组织选择性作用目的研究不同剂量大豆苷原对去势大鼠子宫内膜组织形态以及ERs和PPARγmRNA和蛋白表达水平的影响,探讨大豆苷原对子宫内膜的选择性作用及其机制。方法本实验选用第一部分实验大鼠的子宫组织,检测子宫组织的病理形态,以Realtime-RT-PCR检测子宫内膜ERα、ERβ和PPARγmRNA表达,以免疫组化法检测其蛋白表达。结果1、Dai三个剂量组大鼠子宫湿重较OVX组有所增加,但与OVX组间没有显著性差异,且显著低于E2组。2、L-Dai和M-Dai组大鼠子宫内膜腔上皮、间质、内膜厚度和横切面面积与OVX组间无显著性差异;H-Dai组大鼠子宫内膜腔上皮、间质和内膜厚度较OVX组显著性增厚,并显著高于L-Dai组,但仍显著低于E2组。3、H-Dai组大鼠子宫内膜ERαmRNA和蛋白表达水平均显著高于OVX组,且显著高于L-Dai组;L-Dai和M-Dai组则与OVX组间无显著性差异。4、子宫内膜ERβmRNA仅在Sham组和E2组中检测出,其余组未检出;各组ERβ蛋白均未检出。5、Dai三个剂量组大鼠子宫内膜PPARγmRNA表达水平显著低于OVX组,组间差异无显著性;各组PPARγ蛋白均未检出。结论1、中低剂量大豆苷原对去势大鼠子宫内膜组织没有雌激素样刺激作用,而高剂量大豆苷原可能通过刺激ERα对去势大鼠子宫内膜发挥弱雌激素样作用。2、大鼠子宫内膜组织主要表达ERα。3、大鼠子宫内膜PPARγ的作用还需要进一步研究以明确。第三部分大豆苷原对去势大鼠乳腺的组织选择性作用目的研究不同剂量大豆苷原对去势大鼠乳腺组织形态以及ERs和PPARγmRNA和蛋白表达水平的影响,探讨大豆苷原对乳腺组织的选择性作用及其机制。方法本实验选用第一部分实验大鼠的乳腺组织,检测乳腺组织的病理形态,以Realtime-RT-PCR检测ERα、ERβ和PPARγmRNA表达,以免疫组化法检测其蛋白表达。结果1、OVX组大鼠乳腺呈明显的萎缩状态,Dai三个剂量组大鼠乳腺组织形态较之OVX组无明显改变。2、Dai三个剂量组大鼠乳腺组织ERαmRNA表达水平与OVX组无显著性差异但显著低于E2组。3、乳腺组织ERβmRNA仅在Sham组和E2组中检测出,其余组均未检出。4、Dai三个剂量组大鼠乳腺组织PPARγmRNA表达水平显著低于OVX组,组间差异无显著性。5、除Sham组和E2组外,各组大鼠乳腺均未见腺泡结构,因此ERα、ERβ和PPARγ蛋白表达均未检出。结论1、三个剂量大豆苷原对去势大鼠乳腺组织均没有雌激素样刺激作用,可能和ERα的作用有关。2、大鼠乳腺组织主要表达ERα。3、大鼠乳腺PPARγ的作用还需要进一步研究以明确。