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目的：本研究的目的是寻找最佳细胞因子组合，以及利用RetroNectin提高逆转录病毒介导的多药耐药基因的转染效率，从而为临床治疗做准备。 实验材料和方法：外周血标本均来自2001年15月至2002年5月在天津医科大学附属肿瘤医院住院接受自体外周血干细胞移植的恶性肿瘤患者。标本共22份，男女患者各11人，平均年龄38.8岁。采用CE(卡铂+足叶乙甙)+G-CSF+GM-CSF方案动员后采集。利用磁性细胞分离器对造血干细胞进行分选后，在不同细胞因子组合下进行体外培养：①对照组，不加任何细胞因子；②SCF+IL-3+GM-CSF+TPO；③FL+GM-CSF+IL-4；④SCF+IL-3+FL+TPO；⑤SCF+IL-3+IL-6+FL+GM-CSF；⑥SCF+IL-3+FL+TPO+EPO。观察培养不同时间的细胞总数、CD34+细胞比例及集落形成能力。利用逆转录病毒作载体将多药耐药基因导入造血干细胞，在转染中予细胞因子支持，并利用RetroNectin以提高转染效率。通过Rhodamine 123排出法、RT－PCR、竞争性PCR、集落形成和抗性实验、细胞增殖实验(MTT)检测基因的转染效率及效果。 结果：22份外周血标本中CD34+细胞的比例为1.3±0.28％，分选后CD34+细胞的纯度为90.3±4.35％，回收率为62.39±5.21％。第6组细胞因子组合(SCF+IL-3+FL+TPO 天津医科大学博士学位论文十EPO)支持下，CD34+细胞的增殖能力最强，所占比例最高。在该组细胞因子组合支持下，利用RetroNectin可使逆转录病毒介导的基因转染效率超过20%，转染组的耐药性较未转染组增强。 结论:在SCF+IL一3+FL+TPO+EPO的支持下，利用RetroNectin可以使逆转录病毒介导的多药耐药基因的转染效率达到20%，基本满足了临床治疗的需要。