NT-4、IGF-I在脊髓可塑性及针刺促进脊髓可塑性中关系的探讨

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目的:探讨NT-4和IGF-I在正常猫、部分去背根猫及针刺部分去背根猫的L6背根节(手术侧和非手术侧)和脊髓Ⅱ板层(L3、L5、L6)与背核(L3)表达的时空变化,以了解该两因子在脊髓可塑性及针刺促进脊髓可塑性中的关系。 方法:成年健康雄猫25只随机分为5组:即正常组,备用根术后7天组与14天组(动物行单侧部分去背根手术,即切除一侧L1-L5、L7-S2背根节,保留L6为备用根)、针刺备用根术后7天组与14天组(动物行单侧部分去背根术后针刺)。动物于术后7天、14天分别处死,取正常组一侧、两备用根组手术侧与非手术侧、两针刺组针刺侧与非针刺侧的L6背根节及各组L3、L5、L6节段脊髓,-20℃恒冷箱切片,片厚20μm,分别用兔抗NT-4(1:200)、兔抗IGF-Ⅰ(1:200)抗体行免疫组化ABC法染色。观察、计数并比较各组背根节、脊髓实验侧Ⅱ板层(L3、L5、L6)和背核(L3)中NT-4、IGF-Ⅰ的分布、含量及时空变化。进行组间多个样本均数比较的单因素方差分析、q检验和组内两样本均数比较的配对t检验。 结果:1.NT-4与IGF-Ⅰ在部分去背根组和针刺组备用DRG的表达变化 1.1 NT-4和IGF-Ⅰ在成年猫L6 DRG的大、中小神经元均有表达。去部分背根后7天,备用DRG(术侧)中NT-4阳性神经元数比正常组显著减少(P<0.05),但较非术侧明显增多(P<0.05);至术后14天,术侧备用DRG NT-4阳性神经元比正常组、7天组和非术侧均减少(P<0.05)。IGF-Ⅰ在术后7天,术侧DRG阳性细胞数比正常组显著减少(P<0.05),与非术侧比无差异(P>0.05);术后14天,术侧DRG阳性神经元数与术7天组比无差异(P>0.05),但明显少于非术侧者(P<0.01)。 1.2针刺备用根7天组,针刺侧DRG内NT-4阳性神经元数较正常组和术后7天组显著减少(P<0.05),较相应非针刺侧多(P<0.05);针刺14天组,针刺侧DRG阳性神经元数比术后14天和非针刺侧显著增高(P<0.01),且恢复至正常水平。IGF-Ⅰ在针刺备用根7天,硕士研究生学位论文N科、IGF-l在脊翻可塑性及针刺促进脊做可塑性中关系的探讨针刺侧DRG阳性神经元数较术后7天组显著增加(P<0.05),但仍低于正常水平,且与相应非针刺侧无差异(P>.05):针刺14天,针刺侧DRG阳性神经元比术后14天亦增多 (P<0.01),且恢复至正常水平,但较相应非针刺侧者少(P<0.05)。与针刺7天组比较,针刺侧DRG NT-4和IGF一I阳性神经元在针14天时均比针7天时显著增多(P<0.05)。2.NT4、IGF一I在部分去背根组和针刺组脊髓n板层和背核的表达变化 2.1 NT一4和IGF一在成年猫脊髓n板层及背核的神经元和胶质细胞中均有表达。在术后两时相,L3背核IGF一I阳性神经元先减少后增加(P<0.05),.且在术后14天时恢复至正常水平(P> .05);该两因子在L3、Ls、L6脊髓n板层的表达则无显著性差异(P>0.05),且与正常组亦无差异(P>0 .05)。 2.2针刺7天,针刺侧脊髓L6n板层NT-4阳性神经元数较术后7天组及正常组显著增加(P<0.01)。针14天时,LS、L6n板层阳性神经元数较正常组及术后14天组相应节段均显著增加(P<0 .01)。针刺后L3背核NT一4阳性神经元数无显著性变化(P>.05)。工GF一工在针刺7天组,L6ll板层内阳性神经元较术后7天组及正常组显著增加(P<0.01),L3背核阳性神经元数较术后7天组增多(P<0.05),且恢复至正常水平;针刺14天组,L6n板层和L3背核阳性神经元均较术后14天组及正常组增多(P<0.01)。Lsn板层NT-4阳性神经元和L3背核IGF一I阳性神经元在针后14天时均比针后7天时显著增多(P<0.05)。 结论:部分去背根致备用背根节NT-4阳性神经元数进行性下降,而针刺可逆转这种下降,使针刺侧DRG内NT一4阳性神经元数经历了一个先减少后增加的双向式变化,且针刺后脊髓LS、L6ll板层NT一4阳性神经元数增加。提示NT一4与针刺促进脊髓可塑性有关。IGF一I表现为术后备用DRG阳性神经元数下降,但并未随时间变化而进行性减少,而针刺两时相均可显著增加术侧/针刺侧DRG内阳性细胞数,同时针刺亦促进L6n板层和背核IGF一工表达。提示针刺后IGF一I在背根节、脊髓L6ll板层和背核的表达变化可能与针刺促进脊髓可塑性有关。部分去背根术和针刺备用背根对非术侧和非针刺侧DRG两因子的表达亦有影响。提示非术侧和非针刺侧背根节NT一4和IGF一工亦可能参与了脊髓可塑性和针刺促进脊髓可塑性。
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