定量蛋白质组学可以分析混合样本中蛋白质的动态变化,反映生物体的生理或病理状态等综合信息。本课题利用定量蛋白质组学Stable isotope labeling by amino acids in cell culture(SILAC)标记技术,研究23乙酰泽泻醇B(ABA)的抗肿瘤机制和核受体Nur77对线粒体活性的影响。第一章研究ABA的抗肿瘤机制。ABA是中药泽泻的主要有效成份,具有抗菌、抗病毒、抗过敏、抑制细胞耐药性以及肝保护等生物学功能。近年发现ABA具有肿瘤细胞杀伤作用,但对其作用机制却知之甚少。在本章中,我们应用定量蛋白质组学SILAC技术,筛选ABA作用于肝癌细胞后的差异表达蛋白,经生物信息学分析发现ABA参与调控mTOR/核糖体蛋白质、细胞周期阻滞以及细胞凋亡信号通路。进一步验证发现ABA可能通过抑制mTOR及其下游的p70S6K和4E-BP1信号通路,实现细胞周期G0/G1期阻滞和诱导细胞凋亡。综上所述,本章利用定量蛋白质组学技术系统研究ABA的抗肿瘤机制,为ABA作为抗肿瘤药物的开发提供研究靶点和改造优化思路。第二章主要研究孤儿核受体Nur77对线粒体活性的影响。Nur77是核受体超家族中的一员,其参与细胞的生长、分化、增殖和凋亡等生物学进程。本课题组和其他课题组的研究表明,Nur77的许多生物学功能与线粒体密切相关。因此,我们应用蛋白质组学技术,比较野生型小鼠乳腺癌细胞和Nur77基因敲除小鼠乳腺癌细胞的蛋白质表达谱。发现Nur77基因敲除后,线粒体内膜上的蛋白质复合体相关蛋白发生明显下调。通过对线粒体膜电势以及线粒体活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)检测,表明Nur77可能起到线粒体保护作用。本章通过定量蛋白质组学技术系统的研究了 Nur77对线粒体相关蛋白质的调控,为进一步阐述线粒体在Nur77相关生物学功能中的作用奠定了基础。