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目的:骨肉瘤为儿童和青少年常发的恶性肿瘤,临床症状常表现为骨骼、局部肿块和关节疼痛,虽然早期发现和及时的治疗在很大程度上提高了患者的生存率,但是其病死率仍然较高且易发生肺转移。目前骨肉瘤的治疗方法主要是新辅助化疗和放疗联合保肢手术,由于化疗药物和放疗射线严重危害患者身体,术后骨组织重建术等辅助治疗可以减缓药物毒副作用的影响。己发生转移的患者术后复发性高。因此,对于骨肉瘤分子治疗的靶点的寻找和验证对于骨肉瘤治疗具有积极作用,可以更好的提供理论依据。本文寻找并验证miR-27b-3p和靶基因SMAD1,研究MiR-27b-3p对于骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移作用的影响,为骨肉瘤靶向治疗提供理论依据。方法:(1)通过PITA Sites和miRnada Sites网站查询后,分析比较miR-27b-3p基因序列和SMAD1的序列。采用qRT-PCR实验测量5种OS细胞系(SAOS-2、143B、MG63、U20S、SW1353)中miR-27b-3p的表达量;(2)选用SAOS-2细胞系为研究对象,运用Western Blot技术检测SMAD1分别在Blank组、NC组和miR-27b-3p inhibitor组这三组细胞中的表达量;应用双荧光素酶报告实验确定miR-27b-3p和SMAD1的靶向关系。(3)通过MTT、流式细胞术、Transwell细胞迁移实验和Transwell侵袭实验的实验方法研究miR-27b-3p对SAOS-2细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果:1.生物信息学方法检测结果显示miR-27b与SMAD1-UTR存在结合位点;以143B细胞作为对照组,采用相对定量法的2-??Ct的方法进行分析,结果显示miR-27b-3p在SAOS-2细胞系中的含量减低的倍数最多,因此选择SAOS-2细胞用于后续试验。2.Western Blot实验结果显示沉默miR-27b-3p可以降低SAOS-2细胞中SMAD1的表达量。双荧光酶报告实验结果显示,miR-27b-3p可能通过与SMAD1的3’UTR的位点结合调控基因的表达。3.MTT细胞增殖实验结果显示,抑制miR-27b-3p可以抑制骨肉瘤细胞(SAOS-2)的增殖。Transwell细胞迁移实验提示,抑制miR-27b-3p可以降低骨肉瘤细胞(SAOS-2)的迁移能力。Transwell检测细胞侵袭实验结果显示,抑制miR-27b-3p可以抑制骨肉瘤细胞的侵袭能力。流式细胞仪检测细胞凋亡的结果显示miR-27b-3p可以诱导骨肉瘤细胞凋亡。结论:miR-27b-3p可能通过调控SMAD1的表达从而促进骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡作用。我们的结果表明miR-27b-3p可能在骨肉瘤细胞中起着促癌基因作用。