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色谱固定相是色谱分离的核心。固定相基质表面上不同的改性方式可以产生不同的选择性分离效果。万古霉素作为大环抗生素的一种,具有复杂、独特的分子结构,以其作为表面改性剂,可以与样品分子产生多种分子间相互作用。本文根据万古霉素独特的分子结构特征,通过单体衍生法制备出万古霉素手性毛细管整体柱；间接键合法制备出万古霉素手性液相色谱键合固定相,并将其应用于反相、亲水以及离子交换等色谱分离模式。整体柱具有制备简单、柱容量高、固定相的表面易于改性等特征。因此,通过单体衍生法在聚丙烯酰胺整体基质上键合万古霉素分子,得到万古霉素手性毛细管整体柱。优化后柱制备条件为：以甲酰胺为溶剂,在碱性环境中,万古霉素与GMA的摩尔比例为1：5,反应温度为50℃以及聚合反应时间为6h。在微柱液相色谱恒压模式下将制备的色谱柱用于氨基酸对映体分离,当缓冲液离子强度为10mmol/L、pH=4.5、柱压P=5.0Mpa时,苯丙氨酸的两种对映异构体分离度R为1.49；酪氨酸和色氨酸在缓冲液离子强度为10mmol/L、pH=4.5、柱压P=4.7Mpa时,其分离度R分别为2.99、1.95。以粒径为10μm的氨基硅胶颗粒为载体,戊二醛为间隔臂,制备了万古霉素手性液相色谱键合固定相。制备的色谱柱具有良好的稳定性,重复进样300次,仍能保持良好的分离能力。将其应用于反相、亲水以及阴离子交换等多种液相色谱分离模式,证实其不仅可以应用于正相、反相模式下手性化合物的分离,同时也可应用于像亲水、阴离子交换模式下非手性物质的分离。对于萘帕芬胺、安眠药物、甜菊糖以及有机酸等样品在不同分离模式下进行分离分析,均得到较好的分离效果,进一步拓展了万古霉素手性液相色谱键合固定相的应用范围,也可以为新型色谱固定相设计以及采用特殊结构改性基团的色谱固定相在相应分离模式下进行方法发展提供指导。