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多糖作为植物源活性物质的重要组成部分,具有抗氧化、抗炎、降血脂等生物活性。苦丁茶(Ilex kudingcha)冬青科冬青属乔木植物,在古代曾被称为皋卢、瓜卢等,主产于湖南、湖北、广东、海南等省。本文以苦丁茶多糖为研究对象,对其提取,分离纯化、化学特性分析以及其具有的肝保护、内皮功能紊乱的调节作用做了一系列的研究,旨在为今后植物多糖的研究以及市场应用提供一定的理论基础。本章采用了本实验室成熟的水提醇沉法对苦丁茶粗多糖进行提取,苦丁茶的提取率为6.5%,利用苯酚硫酸法测定苦丁茶粗多糖的总糖含量为59.6%。本试验运用高效液相色谱法分析了苦丁茶多糖的单糖组成。实验结果显示,苦丁茶是一种酸性杂多糖,分别由D-甘露糖、D-核糖、D-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖以及D-半乳糖组成,其中含量较多的为D-半乳糖(31%)和D-阿拉伯糖(24%)。本试验对实验小鼠血清中AST和ALT活性进行了检测,对小鼠肝脏匀浆中MDA、SOD和GSH-Px的水平进行了检测,实验结果表明:苦丁茶多糖对高果糖饮食引起的肝损伤的保护作用随着浓度的增加而增加,在800mg/kg·bw剂量时保护效果最好,对比正常组具有显著性的降低,将AST和ALT水平分别降低到16.28±1.21 U/L(p<0.01)和60.28±0.45 U/L。用苦丁茶多糖对实验小鼠进行灌胃以后相比空白组,MDA水平降低至0.88±0.08nmol/mgprot,而SOD和GSH-Px水平分别升高至22.30±0.91U/mg prot和1188.44±86.97 U/mg prot。小鼠肝脏H&E染色和油红O染色切片直观的体现出高果糖饮食使得模型组的小鼠肝脏出现了不同程度的水肿的局部坏死,细胞形态各异,细胞核萎缩,细胞中空泡较多。但在200、400和800mg/kg·bw剂量组中,肝细胞呈现好转趋势,800mg/kg·bw剂量组效果最佳。实验说明苦丁茶多糖对肝细胞损伤有一定的修复和缓解作用。本试验对高果糖饮食的小鼠血清进行提取,并且检测了血清中与血脂和脂蛋白相关的指标:TC、TG、HDL-C和LDL-C。所得结论为,苦丁茶多糖对高果糖饮食引起的血脂升高和内皮功能紊乱产生了调节,具有缓解和预防作用。通过检测小鼠血清中与血管收缩、舒张相关的活性因子:eNOS、ET-1、 TXA2、PGI2、和TNF-α,结果证明了在苦丁茶多糖的灌胃干预下,PGI2水平有一定程度的升高,而TXA2水平降低,其比值呈现下降趋势。TNF-α指标也呈现出下降趋势,在800mg/kg·bw剂量时效果达到最佳下降至13.64±1.04pg/mL。通过观察小鼠心脏主动脉血管H&E染色切片,模型组的小鼠心血管壁出现了不同程度的变厚,内皮组织断裂。随着苦丁茶多糖灌胃剂量的升高,血管壁变厚现象呈现好转趋势,800mg/kg·bw剂量组效果最佳。实验说明苦丁茶多糖对高果糖饮食引起的内皮细胞损伤有一定的修复和缓解作用。苦丁茶多糖经DEAE-52纤维素洗脱后呈现出三个峰面积较大的洗脱峰,分别为0.05、0.15和0.3mol/L Na Cl浓度洗脱峰。又将0.15M收集的样品经过葡聚糖凝胶进行进一步的纯化,分离出两个峰面积较大的洗脱峰,分别为KD-1和KD-2。红外波谱显示出KD-1与KD-2均具有多糖的特征吸收峰。推测出苦丁茶多糖中所含的吡喃环形的多糖较多。通过SEM电镜扫描图可以看出KD-1性质为片状较脆,而KD-2性质为网状较粘。高效液相色谱图分析KD-2,实验结果表明,单糖组成分别为D-甘露糖(7.6%)、D-鼠李糖(12.3%)、D-半乳糖醛酸(2.7%)、D-木糖(58.4%)、D-半乳糖(3.9%)以及D-阿拉伯糖(14.6%)。其中含量最高的是木糖(58.4%)和阿拉伯糖(14.6%)。