人类精子生成是一个极为复杂的过程，目前对于精子生成的认识远落后于对其他疾病的认识水平。包括人类在内的精子头部有大量的γ-氨基丁酸(GABA)受体分布，相关研究表明GABA与人类精子的获能等相关；此外支持细胞(Sertoli细胞)和间质细胞(Leydig细胞)产生的一氧化氮(NO)可能对生殖细胞的成熟提供一个微环境，在精子的发生和发育过程中具有调节作用，因此推测GABA及一氧化氮合酶(NOS)可能在精子生成障碍的过程中具有一定的作用。 为评价GABA及NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对于精子生成障碍可能具有的作用，我们首先研究了GABA对精子生成障碍不育症患者精子的作用及意义，随后建立大鼠隐睾模型，研究了一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对大鼠隐睾睾丸组织NO与NOS的作用；为进一步明确精子生成尤其是生精障碍过程中的基因水平事件，我们于随后设计了包含GABA受体、eNOS相关蛋白以及部分精子生成障碍相关基因如RBM在内的人cDNA微矩阵芯片，对临床无精子症患者(精子生成停滞或生精功能低下)的睾丸组织及正常生育者睾丸组织的差异表达基因谱进行了研究，并对其中差异表达较明显的部分基因在无精子症睾丸组织内的表达采用原位杂交进行了研究，用以验证芯片杂交结果，随后对原位杂交结果的临床意义及cDNA芯片杂交结果进行了分析研究。 研究发现：1、GABA可以诱导不育患者精子顶体反应(AR)，可以增强获能精子曲线速度、直线速度、精子测摆幅度及鞭打频率(P＜0.05)；L-NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞第四军医大学博士学位论文的凋亡发挥其保护作用，它们可能对于生精障碍的精子质量及数量的改善有一定的治疗作用。2、共获得128个可能与无精子症相关的差异表达基因，其中56个基因表达上调，72个基因表达下调，cDNA微矩阵杂交结果经原位杂交证实。2、可以初步认为GABAR与州05的功能与人精子生成相关，其功能的异常可以导致生精障碍的出现，但它们是原发性改变还是反馈性改变仍需进一步研究。3、Rap1AmRNA在所有无精子症与正常攀丸组织的Leydig细胞内阳性着色。在一些无精子症辜丸组织的生精细胞中也可以看到Rap IA阳性着色，但大部分正常翠丸生精细胞为阴性。其中39例无精子症辜丸有29例生精细胞着色，10例正常翠丸组织中仅2例生精细胞着色，其余8例仅Leydig细胞着色，两组存在的差异具有非常显著意义(P<0.01)。4、新近发现及功能不清的部分基因与蛋白翻译合成、代谢相关、细胞信号和传递、原癌基因和抑癌基因在cDNA微矩阵杂交中表现出优于其它功能种类的基因的改变，除提示精子生成基因水平事件的复杂性以外，对于后续的其他研究以及加深对雄性配子生成机制的认识具有一定的意义。5、cDNA微矩阵技术可以应用于筛选无精子症相关基因的研究中;首次发现Ra，家族成员之一RaP IA在无精子症翠丸组织生精细胞内表达增强，其可能在无精子症的发生与进展过程中起一定的作用。