水稻9311对于水稻细菌性条斑病侵染应答的差异蛋白质组学研究

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水稻细菌性条斑病是由Xanthomonas oryzae pv. oryzicola引起的,在热带、亚热带稻区广泛发生的细菌病害,也是目前威胁我国南方稻区水稻生产的重要病害之一,可以引起5%-40%的产量损失。本研究以对水稻细菌性条斑病极感病的水稻品种-9311为研究对象。通过双向电泳联用质谱技术,研究了9311在水稻细菌性条斑病病菌侵染后4个不同时间段(12h、48h、5d、10d)的叶片全蛋白2-DE图谱的变化,并对差异表达的蛋白质点进行MALDI-TOF/MS分析。2-DE图谱分析结果表明:在病原菌侵染9311后不同时期,共检测到164个差异蛋白出现,其中表达量上升的23个;表达量下降的16个;诱导出现的蛋白71个;抑制表达的蛋白54个。将164个差异蛋白点经MALDI-TOF/MS分析,得到其中106个蛋白的肽质量指纹图谱。通过MASCOT数据库比对,鉴定出水稻细菌性条斑病病菌侵染诱导差异表达蛋白86个。对这86个差异表达蛋白的同源性序列比对以及功能分析,并着重研究了其中的R和PR类蛋白,得到了其中NBS-LRR类蛋白质的同源进化树,以及NBS-LRR类蛋白和RLK/激酶类蛋白的保守区/功能区的分析结果。并根据蛋白序列分析结果,设计PCR引物,经RT-PCR,从水稻cDNA中,获得水稻RLK/激酶类基因片断5个,NBS-LRR类基因片断2个,PR-10基因家族成员基因片断1个。其中一个编号13-3-4的NBS-LRR类基因,在基因库中,与现有的同类基因最高的同源性为91%。经Northern验证,4-3-2基因在接种后12h,48h后表达量逐渐增大。本研究为水稻细菌性条斑病病原菌与寄主植物-水稻之间的侵染相互作用,以及寄主植物的防御应答反应网络研究提供了研究方
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