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前列腺癌为老年男性常见疾病。在我国,近二十年来随着人口老龄化及生活条件的改善,其发病率逐渐增加,跃居我国男性泌尿生殖系统恶性肿瘤的第3位。由于前列腺癌的生物学特性比较复杂,其早期临床症状不显著,出现症状而就诊的患者大部分已属于晚期病例,甚至部分已有远处转移。所以前列腺癌的早期诊断已成为泌尿外科领域一个越来越重要的研究课题。本实验依据荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术与鸟枪法(Shotgun-MS)技术结合进行人正常前列腺细胞与低转移性前列腺癌PC-3细胞系和高转移性前列腺癌PC-3M细胞系差异蛋白质组学等前期系列工作的研究结果,从前列腺癌细胞系PC-3,PC-3M细胞的膜蛋白中选择Dysferlin(230KD),PHEX(90KD),EDG2(43KD),KV1.1(57-59KD)和IL-3Rβ(130KD)五个蛋白,并分别对其在前列腺癌细胞系PC-3,PC-3M以及前列腺(癌)组织中的表达进行验证和检测,旨在寻找与前列腺癌发生、发展及其在前列腺癌诊断方面有意义的新蛋白。结果显示:1.RT-PCR结果表明,DysferlinmRNA和IL-3RβmRNA只在PC-3中有表达,在正常前列腺组织(外周区)和PC-3M细胞中无表达; PHEXmRNA在前列腺癌细胞系PC-3,PC-3M中均有表达,在正常前列腺组织(外周区)中无表达; EDG2mRNA在正常前列腺组织(外周区),PC-3和PC-3M细胞中都有表达; KV1.1 mRNA在正常前列腺组织(外周区),PC-3和PC-3M细胞中都没有表达。2.免疫细胞化学结果表明,Dysferlin,PHEX,KV1.1在PC-3和PC-3M细胞中都有表达,在正常前列腺组织(外周区)上皮细胞中无表达; IL-3Rβ只在PC-3细胞中有表达,在正常前列腺组织(外周区)和PC-3M细胞中无表达;EDG2在正常前列腺组织(外周区)、PC-3和PC-3M细胞中都有表达。3.选蛋白Dysferlin进行系列研究,Western blot结果显示:Dysferlin在PC-3和PC-3M细胞中有表达,在正常前列腺组织(外周区)中没有表达。为了进一步研究Dysferlin在前列腺癌发生发展中的意义,我们用抗Dysferlin的抗体对从临床上收集的前列腺癌组织标本进行了免疫组织化学检测,结果显示:Dysferlin在正常前列腺组织(外周区)上皮细胞中无表达,而在前列腺癌组织中呈阳性表达,其表达阳性率为91.4%;并且随着前列腺癌Gleason评分的增高, Dysferlin在前列腺癌肿瘤细胞中的表达呈下降趋势(P﹤0.05)。此外,Dysferlin在前列腺腺癌中的表达水平显著高于其在前列腺导管癌和前列腺移形细胞癌中的表达(P﹤0.05)。这提示Dysferlin在前列腺腺癌中表达增高可能与组织病理类型存在某种程度的相关性。在发生远处转移的前列腺癌标本中,Dysferlin的表达率为100.0%。以上结果表明,Dysferlin与前列腺癌发生发展密切相关,并估计可能参与前列腺癌的转移过程,并为Dysferlin在前列腺癌发生侵袭转移中功能的研究建立了实验基础