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稻瘟菌效应蛋白在稻瘟菌-水稻互作中起着至关重要的作用。研究效应蛋白对深入了解稻瘟菌致病机制有重要意义,同时也有望为防控稻瘟病提供理论依据。在本实验室前期研究中,通过稻瘟-水稻互作转录谱分析,结合瞬时表达策略,已从101个稻瘟菌候选分泌蛋白中筛选到9个能够诱导植物细胞坏死的预测分泌蛋白,分别命名为MoCdiEP1-9。研究还发现,在植物细胞中表达去除信号肽的蛋白不再诱导植物细胞死亡,表明这些蛋白需要被分泌到植物细胞外发挥功能。为进一步研究MoCdiEPs基因的功能,本论文构建了分别含有这些基因的过表达载体和敲除载体,转化并筛选得到9个基因的稻瘟菌过表达转化子和其中5个基因的稻瘟菌敲除突变体,并对这些转化子菌株的生长速率、菌落形态、产孢量以及致病性等表型进行初步鉴定。研究结果发现,与野生型相比,MoCdiEP1过表达导致稻瘟菌营养生长速度减慢；△MoCdiEP3突变体增强稻瘟菌对大麦的致病性；MoCdiEP7和MoCdiEP9的过表达菌株加快对大麦的致病速度,但不影响最终的致病表型。本研究同时构建了8个基因的麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的原核表达载体,通过诱导表达成功分离、纯化到3个可溶性重组蛋白MoCdiEP1、MiCdiEP2和MoCdiEP6。喷雾接种结果显示,高浓度MoCdiEP1和MoCdiEP2重组蛋白能够诱导水稻叶片枯萎死亡；qRT-PCR分析发现,低浓度MoCdiEP 1和MoCdiEP2重组蛋白处理水稻幼苗,引起水稻OsCht1、OsCht3、OsNAC4、OsPR1b和OsPBZ1等病程相关基因的表达水平显著上调,且低浓度重组蛋白预处理过的水稻株对稻瘟菌表现出抗性增强,表明这些效应蛋白能够激发水稻免疫防御反应。本研究结果为深入了解这些MoCdiEPs蛋白在稻瘟菌-水稻分子互作的作用奠定了一定的基础。