【目的】为避免盲吸法去核造成的大量胞质流失，DNA染色和紫外线照射对卵母细胞造成的伤害，本研究使用化学诱导剂脱羰秋水仙碱(Demecolcine，简称Deme)对延边黄牛卵母细胞进行化学辅助去核，旨在为延边黄牛核移植建立一套操作简便，对卵母细胞损伤少，高效稳定的去核方法，为进一步提高延边黄牛核移植效率打下良好的基础。　　【方法】将体外成熟至中期和末期延边黄牛卵母细胞分别使用浓度为0.2μg/mL、0.3μg/mL、0.4μg/mL的Deme在分别为30min、45min、60min的不同时长下处理，显微操作去除牛卵母细胞核,并将去核的卵母细胞作为受体，构建重构胚并观察发育情况；在不同时期添加6－二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)，观察其对末期卵母细胞核移植的影响；比较不同成熟时期的受体细胞质对延边黄牛卵母细胞体细胞克隆卵裂率以及囊胚发育率的影响。　　【结果】1）体外成熟22h的卵母细胞在0.2μg/mL、0.3μg/mL、0.4μg/mL的Deme溶液中处理45min，显核率与去核率无显著差异，去核率达100％，但是0.2μg/mL处理组的囊胚发育率显著高于其他处理组；45min处理组的显核率显著高于30min、60min处理组，45min处理组的囊胚发育率率高于其他处理组；化学辅助去核法的囊胚发育率显著高于盲吸法。　　2）体外成熟28h后激活的卵母细胞在0.2μg/mL、0.3μg/mL、0.4μg/mL的Deme溶液中处理45min，显核率与去核率无显著差异，去核率达100%，但是0.3μg/mL处理组的囊胚发育率显著高于其他处理组；45min处理组的显核率显著高于30min、60min处理组，45min处理组的囊胚发育率高于其他处理组；化学辅助末期去核法的囊胚发育率显著高于盲吸法。　　3）体外成熟的老化卵母细胞，使用离子霉素单独处理后91%被激活,而在离子霉素联合添加6-DMAP处理后却没有细胞被激活，也就是没有第二极体的排出.另外,融合后使用6-DMAP处理，所得重构胚的囊胚发育率最低，而激活后的卵母细胞立即用6-DMAP处理，所得重构胚的发育能力与无6-DMAP处理的相近。　　4）MII期卵母细胞的显核率与TII期卵母细胞的显核率无显著差异；但是TII期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚发育率均显著高于 MII期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚发育率。　　【结论】将Deme的使用浓度降低至0.2μg/mL、作用时间控制在45min，中期卵母细胞能够达到很好的去核效果。而在末期延边黄牛卵细胞的中，脱羰秋水仙碱的最适使用浓度为0.3μg/mL而最佳作用时间为45min。6-DMAP的联合添加抑制了第二极体的排出，无法激活延边黄牛老化卵母细胞，但所得重构胚的后期发育能力却没有受到影响。但融合后添加6-DMAP处理，将会抑制老化卵母细胞重构胚的后期发育。Deme诱导的显核并不依赖于卵母细胞的成熟时间，但 TII期卵母细胞作为受体胞质构建的重组胚的囊胚发育能力显著高于 MII期的卵母细胞。