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背景：冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease, CAD)是目前临床上多发常见的疾病,同时也是致残率和病死率最高的疾病之一。其发病机理是：体内的炎症反应始终伴随动脉粥样硬化的全过程,并受遗传、环境等因素的影响。在冠脉病变的基础上和炎性因子的刺激下出现易损斑块破裂,引起冠脉血管痉挛、血小板粘附聚集、形成急性血栓致负荷过重,血流急剧减少,导致病变远端的血管非完全性或者完全性闭塞,心肌缺血缺氧,临床上表现为急性冠脉综合症(acute coronary syndrome, ACS)。随着新一代药物洗脱支架(drug eluting stent, DES)的出现,经皮冠脉介入治疗(percutaneous coronary intervention, PCI)的手术指证越来越宽泛,成为CAD患者缓解临床症状、改善生活质量的重要干预手段。尽管PCI术后长期给予双联抗血小板及新型P2Y12受体拮抗剂普拉格雷、替格瑞洛的推广应用,但仍有一部分患者出现术后再狭窄情况并出现相应临床症状,从而影响了手术效果和长期预后。如何在术前准确的预测和评价术后可能会发生再狭窄的患者并给予及时完善的干预措施已成为目前急需解决的问题。目前临床上准确有效评价术后再狭窄的手段主要是冠脉造影(coronary angiography, CAG)和血管内超声(intravascular ultrasound, IVUS),但这两项检查不仅花费较大而且均属于侵入性检查。而非侵入性检查的炎性生物学标志物可用于CAD的危险分级和实时病情监测,有相当高的临床应用价值。因此寻找一种非侵入性、能够定量定性分析并在临床上普遍推广使用的新血清学炎症标志物十分必要。妊娠相关蛋白A(pregnancy associated plasma protein A, PAPP-A)就是这样一种生物学指标。它的分子量为800000,是由两个分子量为38000嗜酸性粒细胞主要碱性蛋白前体(pro-form of eosinphi major basic protein, proMBP)和两个分子量为200000—500000的亚基组成。PAPP-A是锌离子依赖性基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMps)家族中的一员,主要与胰岛素样生长因子轴(Insulin-like growth factor axis, IGFAxis)相关并发挥生物学作用。PAPP-A能特异性水解胰岛素样生长因子结合蛋白-4(insulin-like growth factor binding protein-4, IGFBP-4),使其裂解后成为两个小片段,不能再与胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)结合,引起IGF游离血清学浓度升高。IGF与相应受体结合可促进平滑肌细胞增生迁移、新生内膜形成,导致炎细胞趋化增多和炎症因子释放浸润；引起巨噬细胞、平滑肌细胞吞噬脂质转变为泡沫细胞增多,细胞外基质降解加快,纤维帽状结构变薄,最终导致粥样硬化斑块脆性增加、易破裂。研究发现PAPP-A第14外显子存在基因多态性并与早发CAD易感性有关。Park S等提出PAPP-A基因IVS6+95(C/G)(RS13290387)中也存在单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP),但目前国内外对其基因多态性研究甚少,作用机理尚不明确。在机体组织遭受损伤或者处于炎症状态时,正常人体内含量非常少的C-反应蛋白(C reactive protein, CRP)浓度水平迅速升高。CAD本质是一种炎症反应,故CRP可作为CAD患者易损血液的炎性标志物之一。在病理状态下,由肝细胞合成和分泌的hs-CRP大量释放。它能促进低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)被氧化,氧化修饰低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)最终被巨噬细胞摄取,形成最初的病变脂质条纹；同时加速对内膜的损伤,激活并增加内皮细胞粘附分子(endothelial cell adhesion molecule, ECAM)的表达,从而引起内膜增生和PCI术后再狭窄。尽管体内一些炎性因子的水平被证实与PCI术后再狭窄相关,但PAPP-A及其内含子IVS6+95((C/G))的单核苷酸多态性与术后再狭窄的关系尚不清楚。在本研究中,我们从肘静脉抽取血液标本检测血清可溶性PAPP-A、hs-CRP表达水平及IVS6+95((C/G))的单核苷酸多态性,研究它们与冠脉PCI术后再狭窄的关系。本学位论文的主要研究内容及实验结果如下：目的：本实验旨在探讨UAP患者PAPP-A的血清水平以及IVS6+95(C/G)基因多态性预测UAP患者PCI术后再狭窄的意义。方法：选取2011年1月-2012年8月在山东大学附属省立医院心内科病区住院确诊为UAP并行PCI术治疗的患者(TIMI血流达到3级),术后3-9(4.5±2.6)个月进行冠脉造影随访。选取血管腔内径狭窄≥75%者(再狭窄组)86例、无再狭窄组(对照组)152例。所有患者分别于术前、术后24h抽取外周血,应用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA)方法测定血清PAPP-A、hs-CRP水平。采用试剂盒法提取白细胞DNA,应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)、凝胶电泳成像技术、基因测序方法分析PAPP-A基因IVS6+95(C/G)的多态性,判定其基因型并统计基因型及等位基因的频率。结果再狭窄组术后较术前血清PAPP-A、hs-CRP水平明显增高(P＜0.001)。对照组术后较术前血清PAPP-A、hs-CRP水平明显降低(P＜0.001)。术后两组间比较,再狭窄组的术后PAPP-A、hs-CRP水平明显高于对照组(P＜0.001)。两组术后PAPP-A、hs-CRP与冠脉内径丢失指数呈正相关(r=0.336,0.488,P＜0.01)。再狭窄组IVS6+95中CC基因频率明显高于未发生组(P＜0.05),而等位基因C频率无明显差异。结论PCI术后再狭窄组PAPP-A、hs-CRP血清水平明显升高,可作为预测冠脉再狭窄的指标,IVS6+95(C/G)多态性可能与术后再狭窄有关,其中基因型CC是致病的基础。