超早期推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠膜修复蛋白Dysferlin表达的影响

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背景:骨骼肌损伤的主要原因包括钝挫伤、劳损和撕裂伤,其中钝挫伤和劳损大约占运动相关损伤的90%,其中有超过60%属于钝挫伤,并且高发部位在四肢部和臀部。骨骼肌钝挫伤后主要表现为损伤局部充血,部分肌纤维断裂、扭曲,明显肿胀,横纹不清楚,肌丝紊乱,肌细胞膜破裂。肌细胞膜是肌细胞维持完整性的关键所在,也是维持细胞内外环境稳态的天然屏障。此外,骨骼肌的再生能力很弱,其再生因骨骼肌肌细胞膜是否存在及肌纤维是否完全断裂而有所不同:肌细胞膜未被破坏或损伤不太重时,肌原纤维仅发生部分坏死,肌细胞膜破裂严重或破裂后不能及时修复都会导致肌细胞死亡。因此,骨骼肌细胞膜修复是其在生理和各种病理性膜损伤后存活的必要条件。骨骼肌细胞膜破裂后,若能在最短的时间完成膜修复,就能减少骨骼肌损伤早期的炎性反应,减轻损伤后的炎症反应中对受损肌细胞的吞噬,从而减少因损伤而裂解的肌细胞数目,抑制瘢痕组织的形成,促进骨骼肌完全再生,使损伤的骨骼肌尽可能恢复到最佳状态,也可防止骨骼肌急性损伤转化为慢性损伤,这将大大的提高患者的生活、运动质量。因此,骨骼肌膜修复逐渐成为了一个人们感兴趣且深入研究的主题。中医学认为,推拿具有疏通经络、舒和筋脉、行气活血、调神驭形、活血化瘀、消肿止痛等作用,是治疗骨骼肌损伤等筋病的常用方法。国内关于推拿对骨骼肌损伤修复的研究相对较多,但是有关推拿对骨骼肌损伤后细胞膜修复有无作用,以及具体的机制研究非常罕见。目的:观察超早期推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠肌细胞膜修复相关蛋白Dysferlin表达的影响,探寻Dysferlin在骨骼肌钝挫伤肌细胞膜修复中的作用机制。方法:将经过适应性喂养的55只SD大鼠,随机分成正常对照组(n=5)、自然恢复组(n=25)、推拿组(n=25)。根据推拿治疗的天数计时,自然恢复组和推拿组分别在1 d、2 d、3 d、5 d、7 d五个时间点处死,每亚组每个时间点5只,在腓肠肌造模时被标记的区域内取肌肉组织,运用HE观察组织的形态变化,Western Blot检测蛋白Dysferlin的表达情况,并进行统计学分析。结果:1.HE结果显示:与正常对照组相比,骨骼肌钝挫伤后,1 d和2 d肌纤维出现肿胀;3 d出现炎性细胞浸润且自然恢复组比推拿组更加严重;5 d炎性细胞浸润更加明显;7 d推拿组炎性细胞较5 d明显减少,结缔组织形成较少,7 d自然恢复组有大量的结缔组织填充在肌纤维之间。2.WB结果显示:Dysferlin在模型组中比在正常对照组中的表达明显增多;各个相应时间点推拿组较自然恢复组表达量明显增多(p<0.5),且随着时间的推移Dysferlin在推拿组各亚组、自然恢复组各亚组中的表达量呈逐渐上升趋势。结论:在骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠腓肠肌损伤修复过程中,超早期推拿可增加膜修复蛋白Dysferlin的表达,促进破裂的肌细胞膜及时修复,从而有利于损伤肌细胞的修复,这可能是超早期推拿有利于骨骼肌损伤修复的机制之一。
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