试验于2019年4~8月在黑龙江八一农垦大学全日光温室和塑料大棚内进行。试验品种采用“长春密刺”作为试材,采用盆栽试验,设置棘孢木霉(Trichoderma.asperellum)525分生孢子和厚垣孢子各5个浓度水平,分别为10~3、10~4、10~5、10~6和10~7cfu/g,以无菌水为对照。采用木霉选择性培养基培养木霉菌分生孢子和厚垣孢子,通过测定木霉菌分生孢子和厚垣孢子在土壤中的种群数量,明确木霉菌分生孢子和厚垣孢子在土壤中的动态变化规律,同时测定分析相关土壤酶活性、黄瓜幼苗形态指标、生理生化指标以及抗逆性指标,探明木霉菌分生孢子和厚垣孢子对土壤酶系统的影响及其对黄瓜促生作用的生理机制。通过研究,为未来木霉菌剂的研发提供强有力的理论依据,为设施黄瓜高质量栽培、安全、高产给予技术支撑,同时对设施黄瓜可持续性生产提供了理论支持,对农业生产中减施肥料亦具备一系列引导作用。研究结果如下:1、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对黄瓜幼苗株高、主根长、茎粗、根体积、叶面积等形态指标均展现出显著的促生效应。在播种后10~40d,棘孢木霉525分生孢子浓度浓度越高,促进作用越明显,但10~6cfu/g、10~7cfu/g浓度之间差异不显著,但二者均显著高于其他处理。在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗株高、主根长、茎粗、根体积、叶面积分别比CK高出92.73%和76.36%、93.47%和88.94%、114.72%和108.62%、223.81%和209.52%、337.94%和315.15%。在播种后10~40d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,促进作用越明显,其中10~7cfu/g浓度促进效果最强,其显著高于其他处理,10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著高于其他处理,是促生作用较好的浓度。在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗株高、主根长、茎粗、根体积、叶面积分别比CK高出90.76%、87.44%、112.3%、176.19%、307.81%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗株高、主根长、茎粗、根体积、叶面积分别比CK高出80.15%和67.42%、79.4%和71.86%、102.96%和97.85%、166.67%和157.14%、268.51%和259.28%。2、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对黄瓜幼苗地上部干鲜重、地下部干鲜重等物质积累量指标均有显著地促进作用。在播种后10~40d,棘孢木霉525分生孢子浓度越高,促进作用越明显,但10~6cfu/g、10~7cfu/g浓度之间差异不显著,但二者均显著高于其他处理。在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别比CK高出195.08%和188.18%、217.04%和214%、164.02%和156.09%、275.65%和260.65%。在播种后10~40d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,促进作用越明显,其中10~7cfu/g浓度促进效果最强,其显著高于其他处理;10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著高于其他处理,是促生作用较好的浓度。在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别比CK高出274.98%、334.08%、147.15%、341.52%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重分别比CK高出202.02%和194.91%、276.88%和258.42%、82.23%和79.09%、224.13%和218.91%。3、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对黄瓜幼苗叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、还原糖含量、蔗糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性等生理指标均有显著地促进作用。在播种后10~40d,棘孢木霉525分生孢子浓度越高,促进作用越明显,但10~6cfu/g、10~7cfu/g浓度之间差异不显著,但二者均显著高于其他处理。在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、还原糖含量、蔗糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性分别比CK高出65.05%和63.10%、53.35%和50.70%、344.68%和329.85%、110.56%和103.23%、81.48%和77.48%、205.84%和201.90%、58.06%和53.11%。在播种后10~40d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,促进作用越明显,其中10~7cfu/g浓度促进效果最强,其显著高于其他处理;10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著高于其他处理,是促生作用较好的浓度。在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、还原糖含量、蔗糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性分别比CK高出153.78%、72.29%、446.78%、166.91%、90.14%、211.93%、94.58%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、还原糖含量、蔗糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性分别比CK高出90.48%和85.46%、47.01%和44.24%、244.68%和223.36%、134.68%和128.99%、66.70%和51.29%、176.16%和173.52%、53.17%和49.75%。4、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对黄瓜幼苗过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性等抗逆性指标均有显著地促进作用。在播种后10~40d,棘孢木霉525分生孢子浓度浓度越高,促进作用越明显,但10~6cfu/g、10~7cfu/g浓度之间差异不显著,但二者均显著高于其他处理。在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性分别比CK高出870.75%和852.68%、579.17%和565.76%、492.70%和477.31%、335.61%和324.80%、802.11%和794.06%。在播种后10~40d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,促进作用越明显,其中10~7cfu/g浓度促进效果最强,其显著高于其他处理;10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著高于其他处理,是促生作用较好的浓度。在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性分别比CK高出1148.11%、674.47%、564.58%、361.89%、659.69%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性、抗坏血酸过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性分别比CK高出1040.15%和1016.56%、599.63%和593.06%、518.56%和503.74%、277.16%和270.08%、581.90%和569.24%。5、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量均呈现出先上升后下降的变化趋势。在播种后10~40d,10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理下的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量均高于CK;随着棘孢木霉525分生孢子浓度增高,黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量均呈下降趋势,且10~6cfu/g、10~7cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理显著低于10~3、10~4、10~5棘孢木霉525分生孢子3个处理,但10~6cfu/g、10~7cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理之间差异不显著。在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比CK高出182.54%和195.97%、202.25%和214.76%、170.89%和172.56%;在播种后40d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比10~3cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理下降48.16%和41.44%、31.42%和26.19%、30.17%和29.37%。在播种后10~40d,10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理下的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量均高于CK;随着棘孢木霉525厚垣孢子浓度增高,黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量均呈下降趋势,且10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理显著低于10~3、10~4、10~5、10~6棘孢木霉525厚垣孢子4个处理,10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著低于10~3、10~4cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理。在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比CK高出277.44%、202.2%、170.89%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比CK高出313.61%和322.78%、239.24%和251.05%、193.14%和195.63%;在播种后40d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比10~3cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理下降32.95%、55.33%、55.11%,而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜幼苗脯氨酸含量、质膜透性、丙二醛含量分别比10~3cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理下降21.32%和18.69%、38.37%和33.72%、23.76%和22.71%。6、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对黄瓜土壤蔗糖酶、土壤磷酸酶、土壤蛋白酶、土壤脲酶活性均有显著地促进作用。在播种后0~45d,棘孢木霉525分生孢子浓度浓度越高,对促进作用越明显,但10~6cfu/g、10~7cfu/g浓度之间差异不显著,但二者均显著高于其他处理。在播种后45d,10~7cfu/g、10~6cfu/g棘孢木霉525分生孢子处理的黄瓜土壤蔗糖酶、土壤磷酸酶、土壤蛋白酶、土壤脲酶活性分别比CK高出274.96%和265.36%、412.82%和402.56%、263.64%和254.55%、220.51%和215.38%。在播种后0~45d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,促进作用越明显,其中10~7cfu/g浓度促进效果最强,其显著高于其他处理;10~6cfu/g、10~5cfu/g浓度之间差异不显著但二者均显著高于其他处理,是影响作用较大的浓度。在播种后45d,10~7cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜土壤蔗糖酶、土壤磷酸酶、土壤蛋白酶、土壤脲酶活性分别比CK高出260.57%、512.74%、272.73%、228.21%;而10~6cfu/g、10~5cfu/g棘孢木霉525厚垣孢子处理的黄瓜土壤蔗糖酶、土壤磷酸酶、土壤蛋白酶、土壤脲酶活性分别比CK高出247.91%和242.03%、446.15%和431.30%、227.27%和218.18%、200%和198.87%。7、棘孢木霉525分生孢子和厚垣孢子浓度在10~3、10~4、10~5、10~6、10~7cfu/g处理下,对土壤中木霉菌孢子数量均具有显著影响。在播种后5~45d,棘孢木霉525分生孢子浓度越高,木霉菌落数量越高,其中10~7cfu/g浓度木霉菌菌落数量最高,其显著高于其他处理。在播种后5~45d,棘孢木霉525厚垣孢子浓度越高,木霉菌落数量越高,其中10~7cfu/g浓度木霉菌落数量最高,其显著高于其他处理。