精氨酸激酶（Arginine Kinase，AK）仅存在于无脊椎动物体内，参与能量代谢。小菜蛾PxAK基因的RNAi研究表明通过喂食该基因的dsRNA能抑制基因的表达，并影响小菜蛾的生长发育和繁殖，甚至导致死亡。但是由于dsRNA合成成本高，保存和使用过程中容易降解等问题，难于应用于小菜蛾的控制。为此，本论文尝试在大肠杆菌表达小菜蛾PxAK基因的dsRNA，并研究其效应，为RNAi技术在小菜蛾控制中的应用提供可行的途径。利用定量PCR技术，研究了PxAK基因在小菜蛾生命周期中的表达特征。结果显示PxAK在小菜蛾的整个生活史中都有表达，孵化后14天之内的AK基因相对表达量都在10以下，14天时达到了20左右。这是因为小菜蛾发育到第14天的时候已经进入成虫时期，此时的小菜蛾不但各个器官已经发育成熟，而且运动能力也在变强，因此导致AK基因相对表达量增高。利用PxAK基因全长基因设计引物扩增604bp和546bp的片段，在片段两边加上Hind III和Not I酶切位点，分别命名为AKC和AKFC，前者包括AK活性位点基序（motif CPTNLGT）。将质粒L4440用Hind III和Not I酶切，此载体与经过相同限制酶双酶切并回收的AKC和AKFC片段连接成新的质粒，将其转入大肠杆菌HT115中产生dsRNA。用诱导产生dsRNA的菌液不同浓度处理小菜蛾幼虫，观察记录小菜蛾幼虫死亡率、蛹重、产卵率，结果显示表达dsRNA的大肠杆菌HT115菌液喂食小菜蛾能够干扰AK表达，从而有效影响小菜蛾的生长发育，包括幼虫死亡、体重变轻、产卵量降低。不同菌液处理不同天数结果显示，HT115AKC菌液处理2天以后即表现出RNAi效应，幼虫开始出现死亡现象，4天后表现出明显的抑制效应；而HT115AKFC菌液处理6天后才会表现出明显的抑制效应。说明不含有活性基序的片段处理小菜蛾，其表型RNAi效果在时间上具有滞后性。HT115AKC菌液处理组和HT115AKFC菌液处理组都显示，浓度为100×的时候，干扰效果最好。干扰后的实时荧光定量PCR结果表明，摄食表达dsRNA的大肠杆菌菌液的小菜蛾，体内的PxAK基因的表达得到了明显抑制。HT115AKC菌液处理组和HT115AKFC菌液处理组之间的相对表达量比较显示，含有活性基序的HT115AKC菌液处理组干扰效果好。本研究首次应用大肠杆菌表达dsRNA，并且将其应用于小菜蛾中，并利用与昆虫能量代谢密切相关的精氨酸激酶基因作为目标基因。此项研究表明，精氨酸激酶基因可以成为控制害虫的靶标，将其与表达dsRNA的细菌相结合能够成为控制鳞翅目害虫的新手段，为微生物控制害虫奠定了理论操作基础。