西伯利亚蓼铜伴侣蛋白与铜锌超氧化物歧化酶基因共转化烟草的抗盐性分析

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铜伴侣蛋白是结合铜的小蛋白质,并将结合的铜运送到依赖铜的目标蛋白上。铜结合蛋白不仅可以保护细胞免受铜的毒害,而且可以消除超氧化阴离子的毒性。在植物中,已经鉴定出许多铜分子伴侣家族的成员。根据功能的不同,可以分为三种类型:第一种类型是拟南芥CCH基因,与酵母的ATX1同源,参与了铜的运输和活性氧的清除;该基因在RNA水平和蛋白质水平被研究最透彻的植物铜分子伴侣基因。第二种类型的铜分子伴侣为AtCOX17基因,最近从拟南芥中被分离出来,在功能上与酵母的COX1l7基因同源,也能将铜运输到细胞色素氧化酶分子上,用来修复ROS诱导的电子传递链的中断。第三种类型是从拟南芥基因组中所分离鉴定出的CCS基因,其功能是将铜送至Cu/Zn超氧化物歧化酶。铜锌超氧化物歧化酶是一类抵抗外界氧化胁迫的保护类蛋白,先前我们已将其提交至NCBI,登录号为GQ472846。序列分析表明从第2位氨基酸残基至36位氨基酸残基为其高度保守序列。荧光定量PCR分析表明,在3%NaHCO3铜锌超氧化物歧化酶基因在叶、茎与地下茎中皆有表达,揭示铜锌超氧化物歧化酶基因在盐胁迫下具有不同的表达模式。目前我们已将铜伴侣蛋白基因从西伯利亚蓼中克隆出来,将其与我们先期得到的Cu/Zn超氧化物歧化酶基因共转化至烟草中。结果证明,共转化烟草具有更强的耐NaCl的能力。
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