证候是中医临床辨证论治的核心，它以中医基础理论特别是藏象理论为基础，又指导着方剂的临床应用。因此中医证候的研究，与中医藏象理论和中药复方作用机理紧密相关，是关系到中医理论发展的关键问题。临床调查发现，中医肝病占五脏发病的39.56％，肝郁证及相兼证候则居其首，占肝病总数的41.9％，肝郁证是肝病证候的基本病理变化，是肝证候的核心；肝病证候中以肝郁脾虚最多，占21.22％。因此，研究肝郁证的形成机理，对于中医证候理论的研究，具有重要的理论与现实意义。为解决证候形成机理研究上的困难，应发展符合中医证候特点的动物模型。 笔者依据中医基础理论以及现代中西医结合相对成熟的研究结果，详析“肝主疏泄”的内涵，立足于发病学、临床表现和治疗效应，并结合相关疾病(抑郁症)的现代认识和逍遥散的作用，基于1％蔗糖水消耗量等行为的观察，初步建立了基本符合中医理论的慢性应激肝郁证大鼠模型，并通过血浆ACTH测定、免疫组化法BDNF表达，大鼠脑神经元形态观察，对肝郁证的形成机理进行了初步探讨。本研究不仅为丰富和创新中医肝脏藏象的现代认识，而且为中医临床防治心理应激或心因性疾患做了基础性工作，同时研究了逍遥散抗抑郁的作用机理，以进一步推广其临床应用提供了客观依据，具有较高的理论价值和较大现实意义。 本课题研究分为理论研究和实验研究两部分： 理论部分首先从肝主疏泄功能着手，重点论述人体气机的调节，气血的运行，津液的输布，脾胃的升清降浊，情志的调畅等均取决于肝的疏泄功能。然后讨论了由于情志刺激引起肝失疏泄导致肝郁证的不同表现，着眼于肝气郁滞、疏泄不及的证候特点，进行病机分析和治疗原则探讨。还从肝郁与心理应激、肝郁与抑郁症等方面进行理论探讨，对肝郁、慢性应激及抑郁症三者关系及相关研究的思路及方法进行了初步探讨。认为利用慢性心理应激的方法制作肝郁证动物模型是比较合适的，原因是：(1)情志异常是肝郁证的主要病因，而中医以情志病因来认识心理应激，因此用慢性心理应激的方法制作模型，符合临床肝郁(脾虚)发病的实际。(2)肝郁(脾虚)证主要表现为精神抑郁、多愁善感等症，慢性心理应激使动物出现美味食物摄取减少(抑郁类行为)等，可归属与“肝气郁结，失于条达”，与临床肝郁证的核心症状基本吻合；慢性应激时动物体重增长缓慢则是肝郁而兼脾虚的表现。(3)中医认为情志与肝的关系密切，在对心理应激的调节过程中肝起着决定性的作用，而且临床上与慢性心理应激相关的病证(如抑郁症)，辨证多属中医“郁证”范畴，主要责之于肝，以肝失疏泄(疏泄不及)，肝气郁滞为主要病机，其证多属肝郁脾虚，治疗常有疏肝解郁、健脾和营的逍遥散加减。 实验研究主要进行了三个方面的工作： 1．通过对逍遥散抗抑郁效应的观察，确定进一步研究所用的剂量，包括2个实验： 1．1逍遥散对小鼠强迫游泳不动时间的影响： 采用了小鼠强迫游泳实验“行为绝望”模型，对逍遥散的大剂量中剂量、小剂量的抗抑郁效应进行初步行为测试。结果表明：阿米替林和逍遥散大、中剂量均能明显缩短小鼠强迫游泳的不动时间，与对照组比较差异极显著(P＜0.01)；而逍遥散小剂量对小鼠强迫游泳不动时间 2 慢性应激肝郁证大鼠模型的建立及其形成机制的初步研究无显著影响，与对照组比较差异不显著（HO．05）；逍遥散大剂量与阿米替林作用桐当，二者无显著性差异（AO．05）。结果显示：本方具有的明确的抗抑郁作用。1．2逍遥散对小鼠脑组织单胺类神经递质及其代谢产物的影响： 利用高效液相色谱门PLC）加电化学检测器门CD）检测小鼠脑组织单胺类神经赖及其代谢产物，结果发现：服药 21天之后，服药 21天之后，逍遥散大剂量组的小鼠脑组织的 SMT、SHIAA、NE、DA、yA和OA代谢产物DOPAC含量显著升高，与空白对照组比较均有显著性差异 （八O．05、八0．0门；在逍遥散中剂量组小鼠的脑组织单胺类神经龈中，与空白对照组比较仅5叫T、SHIAA有显著升高P叩．05广 逍遥散小剂量组的小鼠脑组织的m、5叫T、SHIAA、DOPAC含量显著升高，与空白对照组比较均有显著性差异（RO．05、HO．01）；西药阿米替林组与空白对照组比较，5一HT、DA、SHIAA、DOPAC、HVA含量明显升高，（AO．05、RO．01）。见表3、图3． 服药21天之后，逍遥散中剂量组小鼠脑组织的5叫T及其代谢产物SHIAA的比值 （5－HT／SHIAA）显著升高，与空白对照组比较有显著性差异（HO．01）。表4、图4． 服药 21天之后，逍遥散大剂量组、小剂量组小鼠脑组织的 DA及其代谢产物 DOPAC的比值（DA儿OPAC）显著降低，与空白对照组比较有显著性差异（八0．01）。表5、图5。 结果提示：长期给服逍遥散可以升高慢性应激删小鼠脑组织中的卜HT、5－HIAA、NE、DA、HyA和加代谢产物DOPAC水平，这可能是其抗抑郁的机制之一。二．慢性应激肝郁证大鼠模型的建立 我们使用的多种不同应激方法（包括冰水游泳、热环境、断食、断水、昼夜颠倒等）随机组合起来的慢性不可预知应激程序，不仅使动物不能?