骨质疏松症已成为老龄化社会卫生保健的突出问题，并越来越受到世界医学界的重视，这主要是因为骨质疏松症所引起的骨折和疼痛，最常见的骨折是前臂骨折、脊柱骨折和髋部骨折，其中最严重的是髋部骨折，它的发病率和死亡率较高，花费的医疗费用也最高。因此，骨质疏松症严重影响老年人的生活质量。我国自1998年起已开始进入老龄化社会，老年人口占世界老年人口的1／5，亚洲老年人口的1／2，因此，骨质疏松症将耗费我国大量的医疗资源。在大多数国家中，骨质疏松症的发病率女性约为男性的2-4倍，这就是与绝经后体内雌激素减少有关的Ⅰ型性骨质疏松症，这也是本文研究的重点。 总结历代医家所论，中医药对骨质疏松症病因病机的认识，关键在于各种原因所致肾虚，其病性属本虚标实，病位主要在肾，与肝、脾、胃有关，本虚以肾虚为主，涉及肝阴、脾气及气血不足，标实多为胃火、瘀血、气郁。大部分文献认为：肾亏脾虚为本病的基本病理因素，而临床因个人禀赋不同，有不同兼夹症或促进因素。 围绕中医药对骨质疏松症病因病机的基本认识，在导师萧劲夫主任医师的长期临床实践和国家中医药管理局资助课题“益气补肾法防治原发性骨质疏松症的研究”的基础上，本课题对健骨二仙丸防治原发性骨质疏松症进行了一系列研究。健骨二仙丸是由明代古方龟鹿二仙胶化裁而来。龟鹿二仙胶益气壮阳，方选用鹿角、龟板为君药，鹿角通督脉而补阳，龟板通任脉而养阴，“鹿角得龟板，则不虑其浮越之过升；龟板得鹿角，则不患其沉沦之不返”。人参大补元气，气足精固，枸杞养阴补血，益精明日。人参配鹿角补阳气，枸杞配龟板补阴血。四药配伍，两两相合，助阳而又生阴，滋阴又能化阳，阴阳气血交补，由是精生而气旺，气旺而神昌。龟鹿二仙胶实为益气补肾代表之方，可治一切精神气血虚弱等症，抗衰防老，延年益寿。健骨二仙丸是在龟鹿二仙胶基础上，更加强了补肾益气效力，加入药物同时充当赋形剂为丸，以便服用与贮存。 以往的研究虽然发现健骨二仙丸防治骨质疏松症与激素类药物有着明显不同的作用机理，但对其确切的细节却缺乏了解。这主要是由于骨质疏松症的病理机制十分复杂，成分复杂的中药与成分简单的西药在作用机制上差别显著。因此，在以西医理论与研究体系为背景的中医药现代研究中，常常缺少有意义的参照，通常的研究方法在指标的选取上也难脱离西医对疾病理解的窠臼，不能很好地反映中医药理论的本质，故一直难有创新性发现。因此，进一步的研究需要在方法学上有所突破。 本实验以去卵巢大鼠为实验性骨质疏松模型，在研究健骨二仙丸防治去卵巢大鼠骨质疏松的生物力学与骨形态计量学的基础上，对其骨组织进行蛋白质组学 广州中医药大学傅士学位论文 朱海 导师 萧劲夫研究。同时，本实验以体外培养大鼠成骨细胞为材料，研究了健骨二仙丸对成骨细胞活力、蛋白激酶 CoKC人抗凋亡蛋白 Bag刁表达的影响，以及健骨＝仙丸作用途径与雌激素受体的关系。 结果发现：1．健骨二仙丸可有效改善去卵巢大鼠骨质疏松模型骨组织生物力学性能，防止骨量丢失，改善骨结构，其对骨结构及弹性槐度和弹性应力等生物力学指标的改善作用忧于 Prem盯’”。2。健骨二仙丸可以降低去卵巢大鼠的骨高转换率，防止骨量丢失，但健骨二仙丸主要不是通过雌激素样作用生效的，它与Preamrin等雌激素类药物有不同的作用途径。雌激素受体阻断剂不能影响其对培养成骨细胞增殖与活性的促进作用，以及其对蛋白激酶C表达的促进作用。3．雌激素受体p和维生素D受体表达量的改变参与了骨质疏松症的发生及健骨二仙丸的防治机制。去卵巢、雌激素水平下降后，会导致雌激素受体p表达量下降，维生素 D受体表达量上升，健骨二：灿丸和 Premarin对其都有一定的恢复作用。4．PKC信号转导通路与NFkB信－号转导通路在骨质疏松症的发生机理和健骨二仙丸的作用机理中具有重要的作用，健骨二仙丸可通过上调 PKC和 PKC结合蛋白表达量作用于PKC信号通路。F。KC结合蛋白通过对PKC信号转导通路有序性的调节，参与了骨质疏松症的发生与防治过程，健骨二仙丸对C激酶结合蛋臼上调是其防治机理中有别于雌激素类药物的机制之一。5．健骨二仙丸可以抑制培养成骨细胞凋亡，是其防治骨质疏松症的作用机理之一，上调凋亡抑制基因bag上的表达量，进而影响Bcl上旧ax比值是其抗成骨细胞凋亡的具体作用机制之一，Bag刁在抗‘成骨细胞凋亡中是先于Bcl4旧ax的调节因素。ba少1蛋臼还可能通过与分子伴侣］dsc70等的作用，参与了成骨细胞固醇类核受体 （如雌激素受体、维生素D受体〕）功能的调节，这可能也与健骨二仙丸调节成骨细胞功能状态、防治骨质疏松症有关。6．血管生成素相关蛋白3，Y－氨基丁酸（A）受体、P＊ST型酪氨酸磷酸酯酶结合蛋臼，NFkB必须调节于，是其他iJ能参与实验性骨质疏松症发生或防治过程的调节因素。7．本实验认为：“应力因素和生物因素共同调节骨重建过程，雌激素水平下降导致骨重建优化结构破坏，骨小梁应力不均，可