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目的:探讨5-氟尿嘧啶对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad7和转化生长因子βⅠ型受体表达的影响。设计、时间及地点:于2007-02/10在安徽医科大学微生物教研室完成细胞观察实验。材料:标本分别取自因瘢痕疙瘩入院进行整形手术的6例患者,男女各3例,年龄10～40岁。取材部位上肢3例,面部3例。均无系统性疾病和激素注射史,且患者对所取组织用于实验均知情同意。方法:①手术取6例瘢痕疙瘩组织,按文献方法进行成纤维细胞原代培养,待细胞融合后传代。②取4～6代传代细胞接种于96孔板,利用四甲基偶氮唑盐法测定不同浓度(10,20,40,80,160μmol/L)的5-氟尿嘧啶分别干预24,48,72h后瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖能力,计算出5-氟尿嘧啶对于瘢痕疙瘩成纤维细胞最小细胞毒作用的量效和时效。③以第二步实验所得浓度范围为依据,应用蛋白印迹法(Western-blot)检测瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad7和转化生长因子βⅠ型受体表达的变化。④用细胞免疫荧光技术验证western-blot实验。主要观察指标:①成纤维细胞原代培养结果。②以计算出的5-氟尿嘧啶药物浓度和时间为依据,应用蛋白免疫印迹方法(Western-blot)观察不同浓度的5-氟尿嘧啶对转化生长因子β1诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad7和转化生长因子βⅠ型受体表达的影响。③用细胞免疫荧光技术检测加药与空白组细胞中Smad7荧光强弱变化。结果:①经原代培养的成纤维细胞全部成活,形态良好,经5-氟尿嘧啶干预后,细胞形态未发生明显变化。②5-氟尿嘧啶浓度为10μmol/L和20μmol/L作用24 h未发现显著的细胞死亡,与空白对照组相比,差异无显著性(P＞0.05)。③与空白对照组相比,转化生长因子β1组Smad7表达明显减弱,转化生长因子βⅠ型受体表达则显著增强(P均＜0.01);5-氟尿嘧啶干预后可显著增强Smad7的表达,且在5-氟尿嘧啶浓度为20μmol/L时的表达最强(P＜0.01)。④在荧光显微镜下观察发现:对照组(未用药物干预)中Smad7蛋白的荧光强度范围为(±-+),实验组(加入药物干预)中Smad7的荧光强度为(++- +++)。结论:5-氟尿嘧啶能够提高转化生长因子β1诱导的Smad7表达,但对于转化生长因子βⅠ型受体的表达没有明显影响。