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目的:1.体外建立多种血管内皮损伤模型（过氧化氢、高糖、高脂诱导）,通过该模型筛选黄花乌头对于修复血管内皮损伤的有效组分,并初步探讨其作用机制。2.体内建立异丙肾上腺素（ISO）诱导大鼠血管内皮损伤模型,观察黄花乌头有效组分对异丙肾上腺素诱导血管内皮损伤大鼠血管内皮的影响。方法:1.三种血管内皮损伤模型的建立（1）不同浓度的过氧化氢（1、2、3 m M）分别孵育血管环10、20、30 min,通过对血管舒张程度的考察,确定最佳造模浓度和造模时间。（2）不同浓度的葡萄糖（22、44、88 m M）分别孵育血管环0.5、1、2 h,通过对血管舒张程度的考察,确定最佳造模浓度和造模时间。（3）不同浓度的氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）（25、50、100μg/m L）分别孵育血管环15、30、60 min,通过对血管舒张程度的考察,确定最佳造模浓度和造模时间。2.黄花乌头多糖（ACP）及黄花乌头总生物碱（ACA）改善血管内皮损伤的作用将不同浓度的ACP和ACA分别与最佳造模条件的过氧化氢、高糖、高脂共同孵育,根据血管舒张程度与模型组比较,探讨ACA和ACP对血管内皮损伤的修复作用及作用机制。3.ACP和ACA对血管内皮损伤大鼠的改善作用（1）体内实验,200 g左右的SD大鼠分成7组,每组各8只:生理盐水组、ISO诱导的模型组、普萘洛尔对照组、ACP组（200 mg/kg）、ACA组（100 mg/kg）、ACP+ACA高剂量组（200 mg/kg ACP+100 mg/kg ACA）、ACP+ACA低剂量组（100 mg/kg ACP+50 mg/kg ACA）。（2）采用HE染色考察胸主动脉及二级肠系膜动脉血管形态学变化。（3）用离体血管环舒张实验检测各组血管舒张程度的影响。（4）采用蛋白印迹的方法检测ACP、ACA对大鼠炎症相关指标的蛋白表达的影响。结果:1.用不同浓度的过氧化氢孵育血管环,当过氧化氢浓度为2 m M,孵育20 min时,血管损伤程度约为37%,综合考虑血管的舒缩度变化,故选用2 m M H2O2孵育20min为H2O2损伤血管内皮最佳造模条件。2.用不同浓度的葡萄糖孵育血管环,当葡萄糖浓度为44 m M,孵育时间为2 h时,血管舒张度约为40%,综合考虑血管的舒缩度变化,故选用44 m M葡萄糖孵育2h为高糖损伤血管内皮最佳造模条件。3.用不同浓度的OX-LDL孵育血管环,当OX-LDL浓度为50μg/m L,孵育时间为30 min时,血管舒张度约为60%,综合考虑血管的舒缩度变化,故选用50μg/m L OX-LDL孵育30 min为最佳造模条件。4.通过离体血管环舒张实验检测结果发现,2 m M H2O2与200μg/m L ACP孵育离体血管环20 min时,血管舒缩度最佳约为70%,表明ACP对H2O2损伤血管有良好的保护作用。2 m M H2O2与100μg/m L ACA孵育离体血管环20 min时,血管舒缩度最佳约为50%,表明ACA对H2O2损伤血管有一定改善作用。5.44 mM葡萄糖与200μg/mL ACP孵育离体血管环2 h时,血管舒缩度最佳约为70%,表明ACP对高糖损伤血管有良好的保护作用。44 m M葡萄糖与100μg/m L ACA孵育离体血管环2 h时,血管舒缩度最佳约为80%,表明ACA对高糖损伤血管有良好的保护作用。6.50μg/mL OX-LDL与100、200、400μg/m L ACP孵育离体血管环30 min,发现ACP对OX-LDL损伤血管内皮修复作用较为明显,随着浓度增加,修复作用逐渐增强。50μg/m L OX-LDL与100、200、400μg/m L ACA孵育离体血管环30 min,发现ACA对OX-LDL损伤血管内皮修复作用不明显。7.体内实验:Western blot结果表明,ISO诱导的血管内皮损伤大鼠组织蛋白表达的结果表明ACP、ACA及联合高剂量组均对Akt、e NOS、I-κB的磷酸化及白介素-10（IL-10）的蛋白表达水平有明显的促进作用。ACP、ACA及联合高剂量组也可显著降低TLR-4、i NOS和NF-κB通路的蛋白表达水平。HE染色结果表明,空白组的胸主动脉和二级肠系膜动脉的平滑肌细胞排列整齐,内弹力层连接紧密,血管清晰,内皮完整。模型组内皮不完整,平滑肌细胞排列疏松紊乱,血管结构不清晰,内弹性膜断裂,内皮细胞肿大变形,部分脱落坏死,内膜有炎症细胞浸润,各给药组的病变情况与模型组比较,炎症反应有所减轻,内皮细胞数目和平滑肌细胞数目明显增加,排列较为整齐,内皮细胞脱落数目有所减少,炎症细胞浸润程度降低。结论:2 mM H2O2孵育血管20 min、44 mM葡萄糖孵育血管2 h、50μg/m L OX-LDL孵育血管30 min均为良好的造模条件。ACP及ACA对以上三种血管内皮损伤模型具有良好的改善作用。ACP及ACA对ISO诱导的血管内皮损伤大鼠在炎症及内皮损伤方面也具有较好的改善作用。