玉米中WRKY转录因子的克隆和表达分析

来源 :四川师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hemir
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WRKY转录因子家族是最大的转录因子家族之一,而且由WRKY转录因子家族形成的信号网络参与了多种信号调节过程。现有研究表明,WRKY转录因子在抵御生物胁迫和非生物胁迫、种子的生成和萌发、衰老等过程中都发挥了重要的作用。本研究对玉米Q319中的WRKY转录因子进行克隆探讨其在抵抗干旱和高盐非生物胁迫下的作用。   选用玉米Q319的基因组DNA作为玉米WRKY转录因子克隆的模板。采用多种高保真酶克隆了12个WRKY转录因子基因,并进行测序。根据测序结果,预测mRNA序列分析。结果表明:克隆得到12个WRKY基因中每个基因仅含有一个WRKY结构域,且与已知的其它物种的WRKY基因相似性不高。   查找并用PlantCARE在线分析软件分析启动子的顺式作用元件。结果表明:克隆得到的启动子中含有多种与干早胁迫、冷胁迫、热胁迫及激素胁迫等相关的顺式作用元件。   用16%的PEG和150mM。NaCl处理玉米Q319和DH65232,处理2h、6h、12h、24h、48h及复水后24h取材,提取RNA作为Real-timePCR的模板,进行基因表达分析。结果表明:不同处理条件下,不同品种的玉米其不同组织中WRKY基因的表达量发生了相应的变化。其中,ZmWRKY73在两种处理下的各种组织中表达变化均为显著,而ZmWRKY74的表达变化均不显著。经PEG处理后ZmWRKY20在0319中表达变化显著:经NaCl处理后ZmWRKY80的表达量在两个玉米品种的根中变化显著。表明该12个WRKY基因在干旱、高盐胁迫下发挥了重要作用。   通过对玉米WRKY基因启动子分析和基因表达研究的结果将有助于在今后的研究中确定相关基因可能的功能,探讨其在其它逆境条件下的作用。
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