目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。我国虽是乳腺癌的低发地区，但发病率正在逐年上升，发病年龄正在趋向年轻化，而死亡率久无降低，其发展与危害不容忽视。自然杀伤(natural killer，NK)细胞是天然免疫系统的主要效应细胞。NK细胞功能活性的发挥取决于活化性和抑制性信号的综合。NKG2家族是NK细胞表面的一类重要受体。NKG2A是NKG2家族中唯一的抑制性受体，而NKG2D为活化性受体。本研究应用流式细胞术检测37例乳腺癌及13例乳腺良性疾病患者NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D，同时检测免疫功能，并结合临床病理因素(病理类型、组织学分级、腋淋巴结转移、分期及C-erbB2表达情况)作比较分析。旨在探讨乳腺癌与乳腺良性疾病患者外周血NK细胞表面受体NKG2A与NKG2D的平衡状态，分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系，对乳腺癌患者的免疫功能状态、估计病情及预后判断有一定临床价值。 方法：选取2007年5月至2007年10月在河北医科大学第四医院外一科诊治的乳腺癌患者37例，乳腺良性疾病患者13例，年龄18～70岁。所有患者术前均未经过任何治疗。其中乳腺癌组：①根据病理分为：浸润性导管癌21例，浸润性小叶癌10例，其他类型乳腺癌6例；②根据腋淋巴结有无转移分为：无转移患者15例、1～3枚腋淋巴结转移患者8例，≥4枚腋淋巴结转移患者14例；③根据C-erbB2表达情况分为：C-erbB2低表达(-～+)患者20例，C-erbB2高表达(++～+++)患者17例；④根据临床病理分期分为：I期患者8例、II期患者23例、III+IV期患者6例；⑤根据免疫功能分为：免疫功能正常组23例，免疫功能低下组14例。⑥根据组织学分级分为：高分化(I级)组15例，中分化(II级)组15例，低分化(III级)组7例。应用流式细胞术对选取乳腺癌及乳腺良性疾病患者血样标本检测NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D，同时留取血标本进行免疫功能检测。于手术前抽取空腹静脉血2ml，EDTA抗凝，6小时内处理。首先进行外周血单个核细胞的分离，再应用流式细胞术采用三色直接免疫荧光标记法检测NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D。实验结果用Expo 32ADC软件进行分析，得到荧光标记阳性细胞的百分数。 结合患者的病理类型、组织学分级、腋淋巴结转移、分期、免疫功能及C-erbB2表达情况等因素进行相关分析。 统计分析运用SPSS 12.0统计软件分析实验数据。实验结果以x±s表示。两个样本均数的比较应用t检验(t-test)。多组样本均数的差别的多重比较应用SNK-q检验。P＜0.05有统计学意义。 结果： 1.本研究发现乳腺癌患者NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D的表达率(％)分别为40.51±8.30、93.87±3.41。乳腺良性疾病患者NKG2A、NKG2D的表达率(％)分别为22.67±7.31、99.05±0.65。乳腺癌患者NKG2A、NKG2D的表达率与乳腺良性疾病患者相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。 2.乳腺癌患者CD3+、CD4+、CD8+、CD56+细胞百分比分别为58.39±3.60、37.95±7.16、22.98±8.28、17.20±4.47；CD4+/CD8+比值为2.04+1.02。乳腺良性疾病患者CD3+、CD4+、CD8+、CD56+细胞百分比分别为65.55±8.57、58.39±3.60、46.48±5.74、12.53±2.51；CD4+/CD8+比值为2.00±0.65。乳腺癌患者CD3+、CD4+、CD56+细胞百分比与乳腺良性疾病患者相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；CD8+细胞百分比和CD4+/CD8+比值两组无显著差异(P＞0.05)。 3.免疫功能正常的乳腺癌患者NKG2A、NKG2D的表达率(％)分别为41.12±7.77、94.99±3.60。免疫功能低下的乳腺癌患者NKG2A、NKG2D的表达率(％)分别为40.21±8.19、92.10±1.94。两组间NKG2A表达率无显著差异(P＞0.05)，而NKG2D表达率有统计学意义(P＜0.05)。 4 I期、II期、III+IV期乳腺癌患者的NKG2A表达率(％)分别为36.78±11.29、36.50±6.19、51.94±9.16。III+IV期乳腺癌患者NKG2A的表达率分别与I期、II期患者相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；I期与II期患者的表达率相比，无显著差异(P＞0.05)。I期、II期、III+IV期乳腺癌患者的NKG2D表达率(％)分别为98.13±1.00、92.50±2.88、92.43±2.02。三组间的NKG2D表达率的比较，无显著差异(P＞0.05)。 5 本研究发现，乳腺癌腋淋巴结无转移组、1～3枚腋淋巴结转移组及≥4枚腋淋巴结转移组的NKG2A表达率(％)分别为42.07±8.02、42.36±5.74、38.53±8.41。三组间的NKG2A表达率相比，无显著变化(P＞0.05)。乳腺癌腋淋巴结无转移组、1～3枚腋淋巴结转移组及≥4枚腋淋巴结转移组的NKG2D表达率(％)分别为97.34±2.08、92.97±1.69、90.74±0.89。NKG2D的表达率在三组之间进行两两比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。 6 浸润性导管癌，浸润性小叶癌及其他类型乳腺癌患者的NKG2A表达率(％)分别为41.47±7.57、35.58±7.94、46.34±7.39。浸润性导管癌，浸润性小叶癌及其他类型乳腺癌患者的NKG2D表达率(％)分别为94.74±3.43、92.24±2.56、93.72±3.39。NKG2A、NKG2D的表达率在乳腺癌不同病理类型之间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。 7 高分化(Ⅰ级)、中分化(Ⅱ级)、低分化(Ⅲ级)乳腺癌的NKG2A表达率(％)分别为41.74±7.96、39.88±8.45、40.62±6.40。高分化、中分化、低分化乳腺癌的NKG2D表达率(％)分别为93.98±3.85、93.38±3.01、94.75±2.91。NKG2A、NKG2D的表达率在乳腺癌不同组织学分级之间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。 8 乳腺癌患者中C-erbB2低表达组(-～+)、C-erbB2高表达组(++～+++)的NKG2A表达率(％)分别为38.53±7.99、43.42±7.02。NKG2D表达率(％)分别为93.71±3.35、94.12±3.41。NKG2A的表达率在两组之间进行比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。而NKG2D无显著变化(P＞0.05)。 结论： 1.乳腺癌患者外周血NK细胞表面活化性受体NKG2D表达下降，而抑制性受体NKG2A的表达上调，即NKG2A和NKG2D的平衡状态的改变是导致机体免疫监视功能下降的重要因素之一。 2.乳腺癌患者CD3+、CD4+细胞百分比明显低于乳腺良性疾病患者，而NK细胞(CD56+细胞)明显高于良性患者。表明乳腺癌患者T细胞免疫功能低下，细胞免疫功能状态紊乱。而乳腺癌患者NK细胞百分率明显增加，提示可能与NK细胞的抑制性受体活性增强及活化性受体减弱有关。 3.本研究发现NKG2D的表达率在腋淋巴结无转移组、1～3枚腋淋巴结转移组及≥4枚腋淋巴结转移组之间相比，有明显下降趋势，提示NK细胞表面受体NKG2A与NKG2D的不平衡表达与乳腺癌患者病情的进展有一定的相关性。 4 本研究结果显示Ⅲ+Ⅳ期乳腺癌患者与I、Ⅱ期患者的NKG2A表达相比，有上升趋势；而NKG2D的表达无明显变化。 5 本研究未发现NKG2A、NKG2D的表达与乳腺癌的不同病理类型及组织学分级之间有明确的相关性。 6 本研究提示，外周血NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D的测定对于了解肿瘤患者机体免疫功能的状态、估计病情及判断预后具有一定临床价值，并为乳腺癌的免疫治疗提供新的思路和理论依据。