不同生理期山羊卵巢AR和芳香化酶P450的表达

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为了解发情周期不同阶段奶山羊卵巢黄体组织结构的周期变化规律,明确各时期黄体组成细胞的分型、各型的结构特征及不同时期的细胞学变化规律,本研究以发情周期山羊卵巢为试验材料,运用常规组织学石蜡包埋-HE染色方法及透射电镜技术对各时期山羊卵巢的组织结构进行详细观察;进一步运用免疫组织化学SP法对发情周期和不同妊娠时期山羊卵巢组织中AR和P450arom的定位及分布变化规律进行了研究,结合相应时期卵巢内分泌生理特点,探讨AR和P450arom在卵巢功能中的调节作用及在雌性动物生殖方面的功能意义。结果如下:1.山羊周期黄体外包结缔组织被膜,实质主要由大黄体细胞(粒性黄体细胞)和小黄体细胞(膜性黄体细胞)组成,前者数量多,主要位于位于黄体的中央部,后者数量较少,位于黄体的周边及少量散布于大黄体细胞之间;大黄体细胞可分为形态、染色、核形上不同的两种。黄体细胞的形态结构随所处周期的不同阶段而变化,通过大黄体细胞胞质内着色及电镜下细胞分泌颗粒的变化显示其分泌活动随周期进程逐渐下降,黄体细胞的胶原纤维由散步逐渐集合成束。结果表明,黄体组织的形态结构随所处发情周期的不同阶段而变化,退化黄体细胞数量随周期进程逐渐增多;不同发情周期阶段山羊卵巢黄体构型同样可影响生长卵泡和闭锁卵泡的数量。2.在发情周期间山羊卵巢组织中AR和P450arom阳性产物主要定位于黄体被膜,血管的内皮、平滑肌和外膜,黄体细胞及间质细胞;反应产物主要位于核膜和胞质,从阳性细胞数量和着色强度及阳性表达灰度值分析来看,发情期两种蛋白的表达均强于发情前期和发情后期。3.妊娠期卵巢组织中AR和P450arom免疫反应的总体趋势是随妊娠进程由多到少,着色部位由细胞膜向胞质内转移。妊娠前期、妊娠中期和妊娠后期AR的平均灰度值相互间差异均极显著(P<0.01)。在妊娠早期的卵泡膜及颗粒层细胞上有较弱的阳性反应,而中期后阶段的弱阳性反应仅出现在卵泡膜上。妊娠山羊的卵巢的卵泡颗粒细胞和大黄体细胞均有P450arom的表达,黄体细胞上的阳性反应随着妊娠进程有逐渐减弱的趋势,尽管到妊娠后期有个别细胞有表达增强的现象,但整体反应强度较弱。两种蛋白在发情周期和妊娠期的规律表达与不同阶段动物体内生殖内分泌特点相适应,提示AR和P450arom可参与不同生理期卵巢的生殖功能调节。
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