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目的引导骨再生(Guided Bone Regeneration,GBR)作为一种有效的骨增量技术,已被广泛用于临床,其中屏障膜的性能是决定疗效的关键。本实验以壳聚糖和胶原为材料,采用静电纺丝技术制备纳米纤维膜,对其成分结构及生物相容性检测；初步评级纳米纤维膜与冻干膜联合应用于引导骨缺损再生的效果。方法1)、对壳聚糖、胶原、聚环氧乙烷(PEO)三者不同配比混合液的可纺性研究,制备壳聚糖-胶原纳米纤维膜；通过戊二醛蒸汽交联,获得结构稳定的纳米纤维膜。2)、通过扫描电镜(SEM)、傅里叶红外光谱(FT-IR)分析壳聚糖-胶原纳米纤维膜交联前后的结构及成分变化；通过细胞毒性实验及细胞体外生长实验,评估纳米纤维膜的生物相容性。3)、壳聚糖-胶原混合液序列冷冻,经真空低温干燥获得多孔冻干膜；常温机械加压处理后,进行拉伸强度检测。4)、构建SD大鼠临界颅骨缺损模型,应用壳聚糖-胶原纳米纤维膜和冻干膜双层膜、Bio-gide膜、冻干膜覆盖骨缺损,通过影像学及组织学方法评价其引导骨再生的效果。结果1)、当PEO浓度为3.5%时,壳聚糖为1%,胶原为0～6%或壳聚糖为1.5%,胶原为0～3.5%,三者的混合液具有良好的纺丝性,电纺制备的纳米纤维结构均一、表面光滑,且通过连续电纺可制备具有一定厚度的纳米纤维膜。2)、经过戊二醛蒸汽交联,纳米纤维膜在水中的稳定性明显增加,同时SEM观察发现交联后的纤维直径变大。3)、MTT实验结果显示壳聚糖-胶原纳米纤维膜无明显细胞毒性,并可促进细胞早期快速增殖；SEM观察发现纳米纤维膜能为细胞的快速附着、增殖提供良好的微环境。4)、壳聚糖-胶原冻干膜加压处理后,拉伸强度由0.69+0.28MPa增至11.9+2.9MPa；弹性模量达到192.2+39MPa,基本满足了临床应用的强度要求。5)、大鼠颅骨缺损再生实验中,双层膜和Bio-gide膜覆盖组的新骨面积百分比分别为43.1±1.49%和41.36±2.6%,其骨再生效果明显优于单纯冻干膜和空白对照组。结论通过静电纺丝法制备的壳聚糖-胶原纳米纤维膜具有良好的生物相容性,能为细胞生长增殖提供理想的微环境；纳米纤维膜和冻干膜双层屏障膜具有良好的引导骨再生能力。