羊胚胎移植是一项先进的繁殖技术,主要通过超数排卵、同期发情、采卵、检胚和移胚等技术处理实现“借腹怀胎”的目标。但因其技术环节多且环环相扣,一环脱节即全盘失败,故生产上出现问题较多、成功率不高。B超可在无痛苦、无损伤的情况下观察组织器官的超声切面图像。笔者采用这项诊断技术在羊胚胎移植各技术环节中进行监测,试图减少各环节中出现问题的几率,从而提高羊胚胎移植的成功率和经济效益。 1、母羊生殖器官的超声解剖 通过活体B超检测和屠宰对比观察,对母羊的阴道、子宫、卵巢及其周同组织器官做了详细的研究。结果表明:用3.5MHz扇扫探头作体表探查时的最佳位置是在股内侧、乳房后上侧方的少毛区,亦称鼠蹊部。用5.0MHz线阵探头经直肠探查时羊取自然站立保定,掏除直肠内宿粪后用消毒剂润滑过的长柄探头缓缓插入肛门,探头探测面朝下,并作45度角扫查,即可依次显示阴道、子宫颈、膀胱、子宫角和卵巢的声像图。在膀胱液性暗区前下方清晰可见子宫和卵巢为中等强度的同声结构,其包膜周边回声界限明显。强同声带声影的耻骨联合可作为盆腔和腹腔的分界线。其声像图结果经术中B超探查和水浴B超探查所证实。 2、羊胚胎移植模拟实验与生产实验及其B超监测技术 首先用奶山羊和小尾寒羊做胚胎移植模拟实验,而后在一个波尔山羊场和一个无角多赛特绵羊场做生产实验,初步掌握了羊胚胎移植技术及其B超监测技术。供体羊用FSH递减法做超数排卵处理;受体羊用孕酮阴道栓和PMSG做同期发情处理,处理后第6天分别采朋子宫角手术法冲胚和移胚。处理过程中均采用5.0MHz线阵探头经直肠B超监测。结果表明:①供体羊在超排处理后子宫开始增大,子宫壁增厚;卵巢持续增大,处理后24h在卵巢外周开始出现直径2-3mm的小卵泡液性暗区,并随时间推移而慢慢增大;卵泡发育的最佳监测时间为超排处理后的第3-4d,在声像图上可大致数清发育卵泡数量;冲胚前可监测到黄体形成。卵泡声像图表现为液性暗区,黄体声像图表现为夹杂有小回声光点的实质暗区,个别中央仍保留少量液性暗区。②受体同期发情处理后子宫增大,子宫壁增厚,卵巢缓慢增大。至发情表现旺盛时,卵巢上可监测到1-2个卵泡液性暗区,个别可见子宫腔内有少量长条状子宫乳液性回声带。③怀孕受体移胚20d即可监测到直径1cm左右的孕囊。30d左右可监测到孕囊液性暗区中胚节的强同声光点,35d左右可见胎心搏动。胎数鉴定的最佳时间为35-45d。 3、羊胚胎移植生产中的B超监测 在9个进行羊胚胎移植生产的羊场中实施了B超监测。结果表明:①选择供、受体前的B超普查可排除已孕羊、淘汰生殖道异常羊,从而带来直接经济效益,同时可提高胚胎移植成功率。在9个羊场917例普查统计中,准备用作供、受体的母羊已怀孕的占32.57%,有生殖道疾病的占0.87%,两项合计33.44%。生殖道疾病包括子宫蓄脓、卵巢囊肿、输卵管积液、阴道积液等。②供体羊超排处理后3-5d可监测剑发育卵泡,据此可术前预测排卵数,估测采胚数。在3个羊场中对13只供体的监测统计为:B超监测卵泡数:回收胚胎数=142:133。③受体早孕鉴定与胚胎发育监测可及时掌握受体移胚后的妊娠状况。移胚后20-40d即可确诊妊娠羊,鉴定怀胎数。对5个羊场257例的统计表明,早孕监测准确率达100%。④供体冲胚后及受体产后卵巢、子宫机能恢复状况的监测可提高供、受体的再利用率。B超监测尚可用于受体同期发情状况及公羊睾丸发育状况监测等。 4、羊胚胎移植及其B超监测参考图谱创建 经实验研究和生产实践,笔者将收集的羊胚胎移植图片和B超监测的声像图编辑成参考图谱,配以文字说明。相信对相关教学、科研和生产实践有一定的参考价值和指导意义。