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双生病毒是一类植物的单链DNA病毒,在自然界中有广泛的宿主,给农业生产造成了严重危害。甜菜严重曲顶病毒(BSCTV,Beet severe curly top virus)是双生病毒的一个代表种,也是少数能侵染模式植物拟南芥的双生病毒之一。已有的研究表明,曲顶病毒所编码的C4蛋白是病症的决定因子,但是关于C4蛋白具体分子生物学功能的研究还很少。为了研究C4在病毒与植物相互作用中的功能,首先在拟南芥中组成型表达BSCTV的C4基因,发现过表达C4导致宿主发生不正常的细胞分裂而不能成苗。利用诱导表达和微阵列芯片分析发现拟南芥的一个基因RKP(Related to KPC1)的表达受C4蛋白诱导。该基因编码一个RING—finger蛋白,与人类的细胞周期调控因子KPC1同源。研究中发现,RKP基因的插入突变降低了拟南芥对BSCTV侵染的敏感性。原生质体复制实验显示RKP的突变影响了病毒DNA的复制。与野生型相比,rkp突变体的愈伤组织形成速度明显减慢,该结果说明RKP的突变可能影响了植物的细胞分裂。体外的泛素化反应表明RKP是一个有功能的泛素E3连接酶。蛋白Pull down实验显示RKP可以与植物的细胞周期抑制蛋白ICK/KRP蛋白相互作用。在rkp突变体中,ICK2/KRP2蛋白的积累增加,该结果支持了RKP可能影响ICK/KRP蛋白稳定性的假说。同时,BSCTV的侵染导致了原生质体中ICK2/KRP2蛋白积累量的减少;而在拟南芥中过量表达ICK1/KRP1降低了植物对BSCTV的敏感性。本研究阐明了受BSCTV的C4蛋白诱导的泛素连接酶RKP通过调控植物的细胞周期影响病毒的侵染。