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背景和目的系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus, SLE)是一种免疫复合物介导的以多系统受累和血清中多种自身抗体阳性为主要临床特征的弥漫性结缔组织病。CD4+T淋巴细胞异常活化增殖在SLE发病中起核心作用。根据分化和功能特征可将CD4+T细胞分为Th1、Th2, Th17及Treg细胞亚群,各细胞亚群分泌特征性的细胞因子。Th1细胞主要分泌IFN-y, Th2细胞主要分泌IL-4、IL-10,Th17细胞分泌IL-17等致炎因子,Treg细胞则主要起免疫抑制作用。各细胞亚群及其分泌的细胞因子的失衡在SLE发病中起了关键性的作用。Sir2是在研究酵母菌转录沉默时发现的一个基因,具有高度保守性。在各物种中发现的Sir2的同源基因统称为Sirtuins家族。迄今为止,人类中发现的Sirtuins家族由7个成员组成,即Sirtl-Sirt7,其中Sirtl和酵母Sir2同源性最高,目前的研究最多。Sirtl蛋白具有NAD+依赖性组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)活性,可使组蛋白/非组蛋白的赖氨酸残基发生去乙酰化。随着表观遗传学的进展,近年来研究发现CD4+T细胞DNA低甲基化与SLE发病密切相关。然而关于乙酰化在SLE中的作用报道不一,有研究发现乙酰化可以促进SLE自身抗体的产生,也有研究认为SLE患者或MRL/lpr模型鼠中组蛋白H3和H4呈低乙酰化水平,并且乙酰化水平和疾病活动度水平呈负相关。故而去乙酰化酶Sirtl的异常表达可能参与了SLE的发病。Sirtl在胸腺淋巴细胞含量丰富,Jedon等报道Sirtl缺陷小鼠免疫球蛋白沉积于肾脏,类似狼疮肾炎的表现,以及血清中出现高低度的抗核抗体,提示Sirtl可能在SLE发病中起着重要的作用。Res veratrol (Res)是植物在受到病原性进攻和环境恶化时产生的一种多酚类植物抗毒素,广泛存在于植物中,尤其在葡萄、虎杖和花生中含量高,具有抗炎、抗氧化、调节血脂及吞噬自由基等多种生物学活性。近年来研究发现Res具有广泛的抗肿瘤及免疫调节作用而再次掀起研究热潮。Res也是迄今发现最强的Sirtl天然激活剂。故而探讨SLE患者CD4+T细胞Sirtl的表达水平以及Res对SLE患者外周血CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子和CD4+T细胞活化增殖的影响,可能为SLE的治疗提供新的思路。方法1荧光定量PCR法检测Sirtl mRNA在SLE患者和正常对照组间表达水平的差异,其中17例明确诊断的SLE患者,9例正常对照。收集患者资料,依据SLEDAI 2000评分体系评价患者的疾病活动度,按照活动vs稳定和脏器受累情况分组评价。并分析SirtlmRNA表达水平与SLE疾病活动的相关性。2流式细胞仪检测CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子在8例SLE患者和8例正常对照组间的差异。其中6例活动期SLE患者和6例正常对照外周血分离的PBMC经Res20μM和Res40μM干预后,比较不同浓度的Res对CD4+T细胞亚群及其分泌的细胞因子的影响。3 4例活动期SLE患者和5例正常对照组外周血分离的PBMC和CD4+T细胞经CFSE标染后经抗CD3/CD28+IL-2刺激活化增殖,同时分别给予Res10、20和40μM共孵育96小时。5例活动期SLE患者和5例正常对照组外周血分离的PBMC经抗CD3/CD28活化,同时分别给予Resl0、20和40μM共孵育24小时。流式细胞仪检测细胞增殖情况以及T细胞中期活化标志CD25(CD4+CD25+)细胞的比例变化。结果1 SLE患者外周血CD4+T细胞SirtlmRNA表达水平低于正常对照,但是没有统计学意义；活动期SLE患者外周血CD4+T细胞SirtlmRNA表达水平较稳定期和正常对照相比明显下调；有面部红斑患者SirtlmRNA表达水平较无面部红斑患者明显上调；而在肾脏受累方面SirtlmRNA表达没有明显差异。SirtlmRNA表达水平与C3呈正相关。2 SLE患者Th1、Th2、Th17细胞及其分泌的IFN-γ、IL-4和IL-10、IL-17均明显高于对照组,而Treg细胞无明显差异。Res对Th1、Th2细胞及其分泌的IFN-γ、IL-4无明显影响,40μM可明显降低Th17细胞和培养上清中的IL-10. IL-17; Res可降低Treg细胞比例,但是没有显著性差异。3 Res可明显降低SLE患者和正常对照外周血经CD3/CD28+IL-2刺激活化增殖的PBMC和CD4+T细胞,低浓度即有明显的抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用增强,呈现浓度依赖性。而且Res可明显降低SLE患者和正常对照经CD3/CD28活化的CD4+T细胞,随着浓度的增加抑制活化作用逐渐加强。结论该研究结果表明Sirtl可能在SLE发病中发挥重要作用,并与疾病活动度相关。有潜力成为治疗SLE新的药物干预靶点。Res可能通过降低Th17细胞以及细胞因子IL-10、IL-17的水平,抑制PBMC和CD4+T细胞活化增殖,是很有前景的免疫抑制剂。