糖尿病勃起功能障碍的临床证型与实验研究

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目的:通过对糖尿病勃起功能障碍(DMED)患者的中医辨证分型进行调查和统计学分析,研究DMED的证型分布规律,同时联合探讨链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立糖尿病勃起功能障碍动物模型和PTN基因转染大鼠的脂肪组织来源干细胞(ADSCs)以期得到用于基因治疗的种子细胞的可行性及经PTN基因修饰后的ADSCs治疗DMED大鼠的有效性。方法:DMED患者按照勃起功能国际问卷(IIEF-5)评分和中医证型问卷按照气虚证、阴虚证、阳虚证、血瘀证、痰湿证等进行归类。同时体外分离、培养大鼠的ADSCs,利用形态学及流式细胞术进行鉴定;PTN基因转染ADSC s,抗生素G418对转染后的细胞进行筛选;qPCR、Western blot对筛选后细胞的表达进行检测。然后用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,并用阿朴吗啡筛选出DMED大鼠模型。将实验动物分为四组:A、正常对照组;B、生理盐水对照组;C、脂肪干细胞治疗组:D、携带PTN基因的脂肪干细胞治疗组。治疗7天后进行大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均颈动脉压(MAP)的测定。结果:阳虚证和血瘀证积分与IIEF-5评分呈负相关,轻度ED常见证候为气阴两虚证和阳虚血瘀证;中度ED常见证候为气阴两虚证和阴虚血瘀证;重度ED常见证候为阳虚血瘀证和阴虚血瘀证。同时DMED大鼠造模成功,成功获得高表达的携带PTN基因的脂肪干细胞, western blot检测表明PTN蛋白稳定表达。经过治疗后,携带PTN基因的脂肪干细胞治疗组勃起功能改善较明显,其差异具有统计学意义。结论:阳虚证和血瘀证的DMED患者的勃起功能较差,提示DMED病机可能以血瘀为核心和基础。腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠的合适注射剂量为50mg/kg,注射STZ后出现典型的糖尿病临床症状,血糖明显增高,勃起功能明显受损,APO筛选试验可有效筛选ED模型。通过实验获得稳定表达PTN的脂肪组织来源干细胞为糖尿病性勃起障碍的治疗奠定了基础,经过PTN ADSCs治疗,DMED大鼠受损的勃起功能异常可以得到一定程度的恢复。
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