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东北猴头菇的生长气温偏低,生长时间较长,其子实体比较紧密,口感更加丰满、鲜美,营养价值更高。东北猴头菇中的有效活性成分多糖可抗溃疡、抗肿瘤等,但对其缓解体力疲劳活性鲜有报道。忙碌的生活,让“过劳模”们无法从压力中完全逃开,因此,如何缓解疲劳和抵抗疲劳成为目前运动医学和保健医学研究的一个热点问题。本文研究了东北猴头菇多糖(Northeast Hericium Polysaccharide,NHP)对小鼠缓解体力疲劳作用的影响,为其缓解体力疲劳活性研究及相关保健食品应用开发提供参考。(1)定性分析东北猴头菇子实体中活性成分:通过物理方法和化学方法对东北猴头菇子实体中所含的活性成分进行定性分析,确定其含有黄酮类物质、有机酸、生物碱、油脂、酚性物质、氨基酸、多糖类、皂苷、萜类等多种活性物质。(2)东北猴头菇多糖提取纯化工艺的研究:采用水提醇沉法对东北猴头菇多糖进行提取,在单因素实验的基础上,进行响应面试验优化,分析得到东北猴头菇多糖的最佳提取工艺参数为:提取温度100℃,提取时间5h,液料比25:1(mL/g),提取率为4.53%;对比三氯乙酸法和Sevage法对东北猴头菇多糖去蛋白纯化处理效果,效果表明:Sevage法是较柔和的去蛋白方式,蛋白去除率可达99.1%;采用不同体积分数乙醇沉淀东北猴头菇多糖,根据高效液相色谱图和总抗氧化能力实验结果,将乙醇体积分数为80%作为东北猴头菇多糖的最佳醇沉浓度。(3)东北猴头菇多糖分级精制的研究:将粗多糖由离子交换层析分离成中性糖(NHPN)和酸性糖(NHPA),然后选用不同浓度的NaCl水溶液对其进一步分级,得到的6个级分,再由凝胶柱层析分离成单一对称峰,为分子量分布均一的6个级分,其中NHPA-4和NHPA-5在Sepharose CL-6B显示一个多分散的图谱,无清晰的单一对称峰;NHPA-1-1、 NHPA-1-2、NHPA-2-1、NHPA-2-2、NHPA-2-3的单一对称峰有一个广泛的分布,经总糖和糖醛酸检测结果显示其酸性糖含量较少;NHPA-3-1的单一对称峰,集中为酸性糖。因此,NHPA-3-1可由DEAE-纤维素和Sepharose CL-6B结合分级得到,收率为3%。紫外光谱全波长扫描结果表明各级分的纯度较高。NHPA-3-1的单糖组成为甘露糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖=2.2:21.82:68.37:7.97。(4)东北猴头菇多糖缓解体力疲劳功能的研究:采用动物负重游泳实验,对东北猴头菇多糖缓解体力疲劳功能性进行评价,将纯系小鼠随机分成3组,阴性剂量组以医用氯化钠作为试验对照,低剂量组、高剂量组分别以3mg/20g体重小鼠、9mg/20g体重小鼠灌胃NHPA-3-1(灌胃体积为4mL/20g体重小鼠)给药30天,期间动物体重呈增长趋势,无死亡病例;高剂量组与阴性对照组相比,小鼠负重力竭游泳时间显著延长,小鼠体内肝糖原的储备量较多,小鼠血乳酸和血清尿素氮含量较少,说明东北猴头菇多糖具有一定缓解体力疲劳的功能。