目的:研究NPTX2基因在胰腺癌中的甲基化水平并评价其用于胰腺癌诊断的价值。方法:在10例胰腺癌组织和10例癌旁正常胰腺组织中,分别应用qRT-PCR和SYBR Green荧光掺入QMSP检测NPTX2 mRNA表达量及CpG岛序列的甲基化量。分析甲基化转移酶抑制剂5Aza-dC处理胰腺癌细胞株(PANC-1和ASPC1)前后NPTX2 CpG岛序列甲基化修饰和mRNA表达的差异。同时,测序分析NPTX2 CpG岛序列的野生型和MSP扩增产物序列。应用上述建立甲基化定量检测方法分析NPTX2甲基化在胰腺癌、慢性胰腺炎及健康志愿者全血和粪DNA中的差异。结果:①癌旁正常胰腺组织比胰腺癌组织中的NPTX2基因相对高表达(3.526±3.037 vs. 0.276±0.263, P =0.001),甲基化指数(MI)相对较低(1.28%±0.98% vs. 9.02%±7.52%, P <0.05)。②NPTX2在PANC-1细胞株中不表达,而经5Aza-dC处理后明显高表达;在ASPC1细胞株中虽有表达,但处理后表达量明显增高。③测序结果表明AsPC1胰腺癌细胞株中NPTX2 CpG岛检测区段中存在16个甲基化异化的CpG位点。④NPTX2基因MI在胰腺癌患者全血DNA中显著高于健康人(1.80%±1.76% vs.0.84%±0.45%),而粪便DNA暂且未检到组间差异,有待扩大样本量进一步研究。结论:NPTX2基因的甲基化参与胰腺癌的发生,检测其在临床样品中的MI可进一步开发应用于胰腺癌诊断。