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目的:碳青霉烯类抗生素被认为是治疗多重耐药菌感染的最后一道防线,但随着碳青霉烯类抗生素的大量使用,耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌日益增多,新的突变亚型不断被发现,严重威胁到全球人类的健康,给临床抗菌治疗带来极大的挑战。回顾性分析连云港地区2016年1月至2019年6月碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌,明确该地区的耐药基因的携带情况、毒力相关基因的分布特点以及分子流行病学特征,为耐药菌的监测和院感控制工作提供科学依据,对预防耐药菌的爆发流行的发生有一定的指引作用。方法:1、收集连云港市某医院2016年1月至2019年6月的非重复的CRKP菌株26例,所有菌株经VITEK2全自动微生物鉴定药敏分析仪鉴定,实验前经Bruker质谱仪重新鉴定,分析所有菌株的耐药情况及标本信息;2、采用PCR检测ESBLs耐药基因(blaCTX-M,blaSHV,blaTEM),碳青霉烯酶耐药基因(blaKPC,blaNDM,blaVIM,blaIMP,blaOXA-23,blaOXA-48),多粘菌素耐药基因(blaMcr-1);3、采用多重PCR检测Khe、Kphp、pilv、pill、ST23、ST65、ST86等基因,进行ST分型;4、采用多重PCR检测K1、K2等荚膜血清型及KL47、KL64这2个常见的ST11型菌株的荚膜合成位点;5、采用多重PCR检测毒力质粒相关的基因(rmpA、rmpA2、iroN、iutA);6、采用PFGE检测所有菌株,分析有无克隆传播;结果:1、26株菌株全部来自住院患者,其中以康复科为主,占58%。2017年1月至2019年6月,CRKP的平均检出率为13.1%。标本类型以痰液标本和尿液标本为主。药敏结果提示了所有菌株高水平耐药和多重耐药的特点。2、实验菌株碳青霉烯耐药基因携带情况:blaKPC基因73%,bla NDM基因8%,blaIMP基因 4%,bla VIM、bla OXA48、bla OXA23、bla Mcr-1 四种基因未检出。携带 bla CTX-M、bla TEM、bla SHV三种 ESBLs 耐药基因的比例分别为 65.4%、88.5%、100%,同时携带这三种耐药基因的比例为65.4%。3、第一体系ST分型结果:ST11为主,占73.1%,ST65占15.4%,而ST23、ST86、ST258 未检出。4、第二体系分型结果:荚膜血清分型检出wzyK1血清型7.7%,wzyK2未检出。所有ST11型菌株中,wzyKL64阳性率为84%,wzyKL47阳性率为为16%。5、第三体系毒力基因结果:rnpA、rmpA2、iroN、iutA等毒力基因阳性率分别为30.8%、30.8%、7.7%、38.5%,iutA阳性率最高。携带毒力质粒相关基因的ST11型CRKP检出8株,共有7株集中在康复科,7株中6株KL分型为KL64。6、PFGE结果:CRKP存在克隆性传播。结论:产碳青霉烯酶是连云港地区CRKP的最主要的耐药机制,该地区携带的耐药基因主要是blaKPC,主要的ST分型是ST11。康复科的CRKP检出率最多,检出率最高的ESBLs耐药基因类型是bla SHV。PFGE结果显示CRKP存在克隆性传播,检出8例携带毒力质粒相关基因的CRKP,其中7株集中在康复科,主要的KL分型是KL64,应引起相关科室和院感部门的重视。