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本试验根据昆虫与植物的协调进化理论和植物化学防御理论,对苦瓜种子中胰蛋白酶抑制剂进行生物测定,初步得出苦瓜胰蛋白酶抑制剂对斜纹夜蛾幼虫、小菜蛾幼虫和黄曲条跳甲成虫取食及生长发育都具有稳定的抑制作用,得到如下试验结果:
(1)苦瓜胰蛋白酶抑制剂对斜纹夜蛾生物活性的抑制作用:在750μg/mL、1500μg/mL和3000μg/mL浓度下理48小时后,均对斜纹夜蛾有较好的取食抑制作用,取食抑制率随浓度增高抑制率增大,拒食率分别为50.02%、71.58%和74.04%;处理72小时后,各处理浓度对斜纹夜蛾的拒食率分别达到63.96%、82.46%和86.48%。苦瓜胰蛋白酶抑制剂对斜纹夜蛾3龄幼虫虫体增长随浓度的增高和处理时间的延长其抑制作用增强,750μg/mL浓度下处理24小时,对斜纹夜蛾体重增长未表现出取食抑制作用,在1500μg/mL和3000μg/mL浓度下对斜纹夜蛾的增长抑制率分别为22.34%和22.76%;处理48小时后,各浓度处理对斜纹夜蛾虫重增长抑制率分别为52.87%、53.7%和71.04%。苦瓜胰蛋白酶抑制剂对斜纹夜蛾中肠消化酶的活性有一定的抑制作用,在添加20μg时,斜纹夜蛾中肠消化酶活力降低到80%,但再增加苦瓜胰蛋白酶抑制剂的添加量,消化酶的活性基本维持在一定的水平(80%),保持稳定。
(2)苦瓜胰蛋白酶抑制剂对小菜蛾生物活性的抑制作用:在4000μg/mL浓度下处理24小时、48小时、和72小时对小菜蛾2龄幼虫都表现出明显的拒食作用,在选择性试验条件下的拒食率分别为75.87%、68.06%和66.37%;非选择性试验条件下,在浓度为750μg/mL、1500μg/mL和3000μg/mL时处理24小时、48小时和72小时的拒食率分别为(38.53%、46.18%和52.35%)、(42.13%、59.25%和78.16%)和(38.78%、71.74%和83.84%);对小菜蛾3龄幼虫也有较强的拒食作用,选择性试验条件下处理24小时和48小时后的拒食率分别为80.74%和61.74%。苦瓜胰蛋白酶抑制小菜蛾的生长发育,在3000μg/mL浓度下处理24小时的生长抑制率为13.65%,处理48小时1500μg/mL和3000μg/mL对小菜蛾都有抑制作用,抑制率分别为23.89%和30.97,处理72小时后各浓度的生长抑制率分别为21.05%、27.31%和35.59%。添加10μg苦瓜胰蛋白酶抑制剂对小菜蛾中肠消化酶即起到较强的抑制作用,中肠酶活力为80%,随浓度的增高抑制活性保持基本不变。
(3)苦瓜胰蛋白酶抑制剂对黄曲条跳甲成虫具有较强的取食抑制作用:在400μg/mL、500μg/mL、667μg/mL、1000μg/mL和2000μg/mL浓度下处理24小时后对黄曲条跳甲成虫的拒食率分别为31.42%、35.56%、47.20%、47.93%和65.38%,处理48小时后各浓度对黄曲条跳甲成虫的拒食率分别为40.30%、44.53%、44.75%、47.35%和54.68%,随处理苦瓜胰蛋白酶抑制剂浓度的增高对黄曲条跳甲成虫取食抑制率升高,48小时内保持较高的抑制活性。大印乳油对黄曲条跳甲有较强的取食抑制作用,48小时内的抑制活性保持在31.42%-47.93%之间,苦参碱乳油对黄曲条跳甲成虫的拒食作用随苦瓜胰蛋白酶抑制剂浓度的增加显著增加,48小时内各浓度处理抑制率从11.53%至44.45%。苦瓜胰蛋白酶抑制剂与大印乳油混配对防治黄曲条跳甲成虫起到一定的增效作用,与苦参碱乳油混配作用效果与同浓度的苦参碱单剂作用效果相当,表现出效果相加作用,在保证防治效果的同时节省了对杀虫剂的使用,为转苦瓜胰蛋白酶抑制剂基因作物增强黄曲条跳甲的药剂敏感性,提高对黄曲条跳甲的生物防治提供理论基础。