【摘 要】
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目的:制备复合氨甲蝶呤硫酸钙人工骨缓释剂,观察该缓释体在Tris缓冲生理盐水的体外模拟环境中的释药特性,并分析其对对骨肉瘤细胞MG-63抑制作用的特点。方法:以硫酸钙人工骨
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目的:制备复合氨甲蝶呤硫酸钙人工骨缓释剂,观察该缓释体在Tris缓冲生理盐水的体外模拟环境中的释药特性,并分析其对对骨肉瘤细胞MG-63抑制作用的特点。方法:以硫酸钙人工骨为载体,制备载药量为20mg,质量百分比为4%的药粒。采用浸出法,以Tris缓冲生理盐水作为模拟体液,在37℃,转速50rpn的条件下,收集连续20天的标本浸出液,检测药物的体外缓释特性。将MG-63骨肉瘤细胞于37℃, 5%CO2等常规条件下传代培养,待细胞进入对数生长期后进行操作。采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)进行浸出液的体外抑瘤实验。测定其第2,4,6,8,10,12,14,16,18、20天缓释剂浸出液对骨肉瘤细胞的抑制能力。用酶标仪测吸光度值(A),计算抑制率。并采用共聚焦显微镜观察分析肿瘤细胞凋亡形态学变化,观察细胞凋亡现象,进一步分析实验过程中缓释体对肿瘤细胞的抑制作用。结果:复合氨甲蝶呤硫酸钙人工骨缓释剂的体外氨甲蝶呤释放检测结果表明:浸泡前2天出现快速释放,占总量的25.20%,以后在较低水平维持相对稳定的缓慢释放,稳定的释放时间持续18天以上。复合氨甲蝶呤硫酸钙人工骨缓释体不同浸泡时间浸出液的氨蛱蝶呤含量及对骨肉瘤MG-63的抑制率为,浸泡第2,4,6,8,10,12,14,16,18、20天的浸出液的氨蛱蝶呤含量分别为161.598 g/L、127.145 g/L、117.800 g/L、76.334 g/L、97.752 g/L、73.941 g/L、83.252 g/L、116.222 g/L、73.274 g/L、16.946g/L。对骨肉瘤细胞MG-63的抑制率分别为64.2%、31.4%、28.6%、22.2%、21.0%、20.0%、19.8%、18.2%、13.4%、12.4%。结论:硫酸钙人工骨复合氨甲蝶呤具有良好的缓释功能,在18天内对骨肉瘤细胞MG-63维持良好有效的抑制率。
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