【摘 要】
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目的: 研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中线粒体下游的信号通路及Bid在细胞凋亡中的作用。 方法: 在VES诱导SGC-7901细胞凋亡过
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目的: 研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中线粒体下游的信号通路及Bid在细胞凋亡中的作用。
方法: 在VES诱导SGC-7901细胞凋亡过程中,检测内源性途径线粒体下游相关凋亡蛋白caspase-9、caspase-3、PARP的活性和细胞浆中AIF、Smae的表达。检测Bid蛋白的活化；用RNA瞬时干扰阻断Bid的表达,比较Bid阴性表达细胞和Bid阳性表达细胞的细胞凋亡率、线粒体膜电位(△Ψm)、胞浆中细胞色素c含量和PARP活化程度。用反义寡核苷酸阻断Fas表达,检测Bid的活性。
结果: VES作用细胞后,caspase-9、caspase-3、PARP发生活化,线粒体内促凋亡蛋白AIF、Smac释放入胞浆:Bid发生活化,Bid阴性表达细胞较Bid阳性表达细胞其细胞凋亡率降低,线粒体膜电位升高,胞浆中cytochrome c含量减少,PARP活化减弱。阻断Fas后,Bid的活化也被阻断。
结论: VES诱导SGC-7901细胞凋亡过程中线粒体下游相关凋亡蛋白活化。Bid在细胞凋亡中发挥重要作用且外源性途径中的Fas可将凋亡信号传递给Bid。综合前期VES诱导SGC-7901细胞中同时存在Fas介导的外源性途径,我们推断出VES诱导SGC-7901细胞凋亡中,内外源性途径并存,且Bid是连接内外源性途径的结点。
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