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目的:通过观察干姜、高良姜、丁香、小茴香、吴茱萸、肉桂、花椒、胡椒、荜茇、荜澄茄等十味温中散寒药对胃实寒证大鼠环核苷酸含量、交感神经-肾上腺系统机能、内分泌机能的影响,阐释温中散寒药温热药性本质。 方法:取SPF级SD大鼠150只,随机取其中10只作为空白组,剩下的大鼠采用寒冷因素加寒凉药刺激造模,给予灌服冰寒凉药。造模成功后将大鼠随机分为模型组、附子组、干姜组、高良姜组、丁香组、小茴香组、吴茱萸组、肉桂组、花椒组、胡椒组、荜茇组、荜澄茄组、黄连组、石膏组共14组。空白组、模型组灌服蒸馏水,其余各组分别灌服各受试药物。采用酶联免疫法测定胃组织cAMP、cGMP、AC、PDE含量,计算cAMP/cGMP比值,观察10味温中散寒类中药对胃实寒证大鼠胃组织cAMP、cGMP、AC、PDE含量及cAMP/cGMP比值的影响;采用酶联免疫法测定血清ACTH、DβH的含量,高效液相荧光检测法测定尿液CAs排泄量,包括肾上腺素Ad,去甲肾上腺素NE,多巴胺DA的排泄量,荧光分光光度法检测尿液17-OHCS的排泄量,观察10味温中散寒类中药对胃实寒证大鼠交感神经-肾上腺系统机能的影响;采用酶联免疫法测定血清TSH的含量,放免法测定血清T3、T4含量,观察10味温中散寒类中药对胃实寒证大鼠内分泌机能的影响。 结果:1.十味温中散寒药对胃实寒证大鼠环核苷酸含量的影响 (1)对胃实寒证大鼠胃组织cAMP、cGMP含量极其比值的影响 模型组cAMP值、cAMP/cGMP比值与空白组比明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);cGMP值改变不明显。治疗后各组cAMP值、cAMP/cGMP比值显著升高。反性药石膏、黄连组与空白组比较,其cAMP值、cAMP/cGMP值显著降低(P<0.01),cGMP稍升高但无统计学差异;与模型组比较此三项变化均无统计学差异。 (2)对胃组织腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)活力的影响 模型组AC值明显降低(P<0.05),给药后各温中散寒药组AC值均显著升高(P<0.01或P<0.05);反性药黄连组、石膏组与模型组比较AC值稍降低,差别无统计学意义。表明温中散寒药均能显著升高胃实寒证大鼠胃组织AC值。 模型组PDE值明显升高(P<0.05),给药后各组PDE值均显著降低(P<0.01或P<0.05);反性药黄连组、石膏组与模型组比较PDE值稍降低,差异无统计学意义。表明温中散寒药均能显著降低胃实寒证大鼠胃组织PDE值。 2.十味温中散寒药对胃实寒证大鼠交感神经-肾上腺系统机能的影响 (1)对血清中促肾上腺皮质素(ACTH)、多巴胺β羟化酶(DβH)的影响 造模成功后模型组ACTH、DβH含量均显著降低(P<0.01)。给药后各治疗组血清中ACTH、DβH含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);反性药石膏组、黄连组与模型组比较ACTH继续显著降低(P<0.01或P<0.05),DβH与模型组比无显著性差异,与空白组比显著降低(P<0.01)。 (2)对尿液17-羟皮质类固醇(17-OHCS)、儿茶酚胺(CAs)排泄量的影响 各治疗组药物均能增加胃实寒证大鼠尿液17-OHCS、NE、Ad、DA的排出量(P<0.01或 P<0.05),反性药黄连组、石膏组大鼠尿液17-OHCS、NE、Ad、DA排出量与空白组及各治疗组均显著降低(P<0.01或P<0.05)。 3.十味温中散寒药对胃实寒证大鼠内分泌机能的影响 (1)对血清中促甲状腺素(TSH)含量的影响 造模成功后模型组TSH显著降低(P<0.01),给药后各治疗药组血清中TSH均显著升高(P<0.01或P<0.05);反性药石膏组、黄连组血清中TSH含量与空白组均显著降低(P<0.01或P<0.05),比模型组稍高,差异无统计学意义。 (2)对血清中甲状腺素(T3、T4)活力的影响 各治疗组药物均能显著升高胃实寒证大鼠血清T3、T4的活力值(P<0.01或P<0.05),反性药黄连组、石膏组血清T3、T4的活力值与空白组比均显著降低(P<0.01或P<0.05),与模型组比稍高,差异无统计学意义。 结论:1.温中散寒类中药是通过升高细胞内AC的含量,降低PDE的含量,从而加快cAMP合成,减少cAMP、cGMP水解,进而升高胃实寒证大鼠胃组织细胞内cAMP水平,调节cAMP/cGMP比值平衡,恢复胃的正常运化功能。以寒性药石膏、黄连作为反性对照,结果显示:石膏组、黄连组对AC、PDE、cAMP、cAMP/cGMP比值的影响趋势与各温中散寒药组相反,进一步证实温中散寒药的温热药性本质与 AC、PDE、cAMP、cAMP/cGMP比值的改变有密切关系。 2.造模成功后模型组ACTH、DβH、17-OHCS、CAs含量均降低,分别给予10味温中散寒类中药治疗后,各组激素水平均能不同程度的升高,说明这10味温中散寒类中药能够提高交感神经-肾上腺系统机能。本研究结果显示:其影响途径可能是通过升高ACTH、DβH的浓度,进而增强体内17-OHCS、CAs的水平,使尿液中17-OHCS、CAs的排泄量增加。 3.10种温中散寒药均能不同程度的增加胃实寒证大鼠血清中TSH、T3、T4含量,提示温中散寒类中药能够使大鼠内分泌增强,可能是通过增加TSH分泌进而使T3、T4分泌增强。 4.反性对照药石膏组、黄连组大鼠各项指标与模型组比较并没有得到明显的改善,但与空白组、治疗组比较都有着与模型组有着同样的作用趋势,提示我们两点:①通过与反性药组的对比,进一步提示我们温中散寒药对胃实寒证大鼠起着与反性药石膏、黄连相反的作用及作用趋势。②石膏、黄连组作为寒性中药,对胃实寒证大鼠的胃实寒症状没有明显的改善作用,但同时与知母的寒性也没有叠加作用。