橄榄叶多酚类化合物的提取、纯化和抗氧化性能研究

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橄榄为橄榄科橄榄属常绿乔木,具有药用价值高、营养成分丰富、综合利用途径多的特点,是我国珍贵的药食两用资源。近年来,我国橄榄产业化正快速推进,橄榄种植面积也日益扩大。但由于目前橄榄叶基本没被利用起来,处于废弃闲置状态,因此,就累积产生了大量的橄榄落叶废弃物,造成了巨大的资源浪费和环境污染。因此若能加强对废弃橄榄落叶的研究开发,实现废弃橄榄叶的有效利用,达到变废为宝的目的,不但可促进橄榄资源的充分开发,提高橄榄资源的利用率,还可以带来巨大的经济效益、社会效益和生态效益。本论文以橄榄叶为原料,通过单因素实验和均匀实验,确定出了橄榄叶多酚的优化提取条件;针对橄榄叶多酚粗提物,探索了大孔吸附树脂分离纯化橄榄叶多酚的条件;通过体外实验考察了橄榄叶多酚的抗氧化活性;运用特征显色反应、紫外光谱和高效液相色谱法对橄榄叶多酚的化学成分进行了初步的研究。主要研究结果如下:(1)在提取工艺研究中,采用溶剂浸提法,通过单因素实验考察了提取过程中乙醇浓度、提取温度、原料颗粒度、浸提时间和固液比多种因素对橄榄叶多酚提取得率的影响。并通过均匀实验得到了优化提取条件:乙醇溶液61%,固液比1:30,橄榄叶颗粒小于80目,提取温度20℃,提取时间0.7h。(2)6种吸附树脂静态实验和静态动力学曲线测定结果表明,HPD-722型大孔吸附树脂对橄榄叶多酚具有良好的吸附和解吸性能。通过动态试验确定HPD-722型树脂的吸附条件为:流速为2mL/min,样液浓度为20mg/mL;用90%的乙醇进行洗脱,并对HPD-722型树脂的吸附动力学、热力学进行了理论研究。(3)通过六种不同的体系(食用猪油、超氧阴离子O2-·、羟基自由基·OH、还原能力、亚硝酸盐和H2O2)研究了橄榄叶多酚提取物的抗氧化性能,并与维生素C和TBHQ进行了比较。结果表明,在猪油脂体系中,试样A的抗氧化性能比维生素C低,试样B的抗氧化性能强于试样A和维生素C,只比TBHQ的抗氧化性能低。在超氧阴离子O2-·体系中,试样A、试样B和TBHQ在低浓度下不具备清除超氧阴离子自由基的能力。相反,促进了该自由基的形成。在羟基自由基·0H体系中,试样A、试样B清除·OH的能力都弱于维生素C,试样B的清除能力强于试样A,与TBHQ的效果相当。在还原能力体系中,试样A有一定的还原能力,但比较弱,试样B的还原能力强于试样A及TBHQ,和维生素C很接近。在亚硝酸盐体系中,试样A、试样B的清除能力都不及维生素C,但都比同浓度的TBHQ强。在H2O2体系中,试样A的清除能力弱于试样B,试样B的清除能力与TBHQ相当,只弱于维生素C。(4)经过特征显色反应初步确定样品A和B中都含有多酚类物质;对样品A和B进行紫外光谱扫描,样品图谱具有多酚类物质的特征吸收峰;利用高效液相色谱,从样品B中分离出了三种物质,分别是没食子酸、槲皮素和穗花杉双黄酮,这三种物质的含量分别为:14.690mg/g、9.844mg/g、1.613mg/g。
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