油菜是我国的主要油料作物,大约有40%的食用植物油来源于油菜。长期以来,选育高产优质油菜一直是育种家所面临的主要任务。实践证明,杂种优势利用是提高油菜产量的主要途径。目前,细胞核雄性不育已成为甘蓝型油菜杂种优势利用的一条有效途径,因此其机理及其应用研究一直深受人们的重视。雄性不育的机理十分复杂,涉及到小孢子发育的一系列基因。要彻底阐明雄性不育产生的机制,必须分离、克隆出小孢子发育过程中的相关基因,并对其特征特性进行研究。从一对等位基因入手,是解决这一问题的有效途径。本研究以甘蓝型油菜双隐性细胞核雄性不育两用系479AB为材料,从形态,细胞学和分子水平上,对可育株系和不育株系的表达特征进行研究,取得如下结果:1.从细胞学水平,观察确定了甘蓝型油菜双隐性细胞核雄性不育两用系479AB的败育时期。不育系从减数分裂时期就开始发生异常,出现了染色体桥,花粉母细胞分裂不同步等现象,随后形成大小不等的四分体或多分体,小孢子释放以后没有开始花粉壁的形成,并且细胞质逐渐降解,最后只剩下降解后的残渣,药室也随之萎缩变形。2.通过cDNA-AFLP方法揭示了不育系中可育株与不育株的几种表达差异。RNA经过反转录后,采用两组引物进行cDNA-AFLP扩增,结果表明,每对引物平均可扩增50条清楚的条带。根据差异带的有无及强弱,可分以下几种:(1)可育株和不育株花蕾之间,雌蕊之间,雄蕊之间存在差异,一些基因只在可育株中表达,而另一些只在不育株中表达;开花期叶片不育株和可育株之间基因表达无差异;(2)组织特异性条带:在可育株不同大小的花蕾及雄蕊中均存在,而雌蕊和叶片没有的差异带,推测是雄蕊特异性的。(3)不育雌蕊中特异表达的条带,不育株大花蕾的雌蕊中出现了许多特异带,是可育株雌蕊和其它组织没有的,而且大花蕾的雌蕊中也缺少了许多别的组织和时期中都共有的带。3.依据cDNA-AFLP差异显示结果,对雄性不育和可育油菜12种不同组织基因表达差异条带进行了聚类分析。结果表明,不育株叶片与可育株叶片的基因表达情况一致;小