沙利度胺对人鼻咽癌细胞株血管内皮生长因子表达及体外放射敏感性影响的实验研究

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第一部分沙利度胺对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞血管内皮生长因子表达的影响目的:探讨沙利度胺对人鼻咽癌细胞株体外生长及对血管内皮生长因子表达的影响。方法:采用四唑氮蓝法(MTT)检测不同时间点、不同浓度沙利度胺对人鼻咽癌细胞增殖的抑制率;RT-PCR检测沙利度胺作用前后血管内皮生长因子和血管内皮生长因子C基因表达水平的变化;免疫细胞化学方法检测其相应蛋白表达水平的变化,并进行相关分析。结果:沙利度胺抑制CNE-2细胞增殖,呈时间和浓度依赖性,当60mg/L沙利度胺作用72h,其抑制率为45.64%;不同浓度沙利度胺作用后VEGF mRNA和VEGF-C mRNA表达均较前降低,VEGF mRNA下降更显著;蛋白表达与其相应mRNA呈正相关。结论:沙利度胺能够抑制CNE-2细胞的增殖,其作用机制可能与其下调血管内皮生长因子的表达相关。第二部分沙利度胺联合放射线对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞体外放射敏感性的影响目的:探讨在体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE-2中,沙利度胺对其细胞周期分布及放射敏感性的影响。方法:应用流式细胞仪技术分析沙利度胺作用24小时后CNE-2细胞周期分布的变化;采用沙利度胺及放射线单独或联合作用于CNE-2细胞,用克隆形成法经单击多靶模型拟合细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比。结果:流式细胞仪分析表明经沙利度胺作用24小时,随着沙利度胺浓度的增加,CNE-2细胞中处于G0/G1期的细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,但变化差异无统计学意义;20mg/L和40mg/L沙利度胺作用CNE-2细胞24h后均见到放射增敏作用,SER分别为1.29(0.941/0.728)和1.57(0.941/0.598)。结论:沙利度胺具有一定的放射增敏作用,为临床放疗和沙利度胺的联合应用提供了实验依据。
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