Rebaudioside-A是甜菊糖苷混合物中所含苷类的一种,与所含的其它糖苷相比,它的甜度约为蔗糖的350-450倍,无后苦味。现今发现Rebaudioside-A的含量越高,甜味越纯正,且甜菊糖苷被广泛用于医药、食品饮料等领域,因此,研究提高甜菊糖苷产品中Rebaudioside-A的含量有着非常重要的意义。本文以甜菊糖苷作为研究对象,先利用超声波辅助酶法从甜叶菊中提取甜菊糖苷,并通过正交试验优化提取条件；然后将甜菊糖苷作为原料,利用硅胶柱层析的方法分离出Rebaudioside-A,同样用正交试验优化分离条件,从而找到最优分离条件；之后又将甜菊糖苷先通过结晶法分离出Rebaudioside-A,然后用大孔吸附树脂对母液中的甜菊苷和Rebaudioside-A组分进行分离纯化。得到的相关结论如下：(1)通过单因素实验及正交试验对提取条件的优化,结果显示：在液料比(V/W)为12,提取溶液pH为4.5～5.5,酶的质量浓度为0.15%,超声时间为80mmin,提取温度为60℃,以及超声功率为50W的条件下,合并四次提取液,得到甜菊糖苷的提取率为12.9%。与传统的提取法相比,超声波辅助纤维素酶提取甜菊糖苷的方法既缩短了提取所需的时间,也降低了提取所需的温度,从而节省了能耗。(2)提取液的除杂过程中,用脱色率和甜菊糖苷的损失率来确定复合絮凝剂硫酸铝钾和氧化钙的用量。结果表明,当硫酸铝钾与氧化钙的用量比为1.4：1时,提取液的脱色率最大,提取液中甜菊糖苷的损失率较小。(3)硅胶柱层析分离Rebaudioside-A的实验中,先将样品的加样形式、洗脱过程中是否加压以及洗脱剂种类进行初选实验,结果表明：甜菊糖苷与硅胶的拌样、洗脱时加压以及二氯甲烷与甲醇按一定比例混合的洗脱剂对分离Rebaudioside-A影响较大。之后对甜菊糖苷的上样量、上柱的硅胶量、洗脱剂的配比及洗脱过程中的流速进行单因素实验和正交试验,经分析,当上样量与硅胶量的比例为1：17.5,洗脱剂二氯甲烷与甲醇的配比为3：2,流速为60滴/min时,可得到纯度为93.4%的Rebaudioside-A,并且收率可达到51.3%。而且用此条件进行放大实验,所得的结果很接近,可靠性好,并且也得到了纯度高达为95.1%的Rebaudioside-A。(4)甜菊糖苷是由多种苷类组成,其中包括Rebaudioside-A和甜菊苷,一般甜菊糖苷经结晶后,母液中还含有Rebaudioside-A和大量的甜菊苷。本实验先将甜菊糖苷进行结晶,得到纯度为91.9%的Rebaudioside-A且收率为51.0%,然后将母液经ADS-8大孔吸附树脂吸附3～4h后,用85%甲醇溶液,在60滴/min的洗脱速度下进行洗脱,可得到纯度为93.8%的甜菊苷且收率为78.5%；另外,可得到纯度为90.5%的Rebaudioside-A,但收率却很低。