南葶苈子抗肿瘤活性及HMGR基因初步研究

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作为传统中药材,南葶苈子具有泻肺平喘、行水消肿之功效。广泛应用于心血管、痰多咳喘、高血脂、尿道系统结石、损伤和创伤及急性咽炎等疾病的预防和治疗,效果显著。现代药理学研究证明,南葶苈子具有广泛的生物活性,如扩张血管、降低血脂、止咳平喘、促进伤口愈合等等。抗肿瘤实验表明,葶苈子在很低剂量时,即可对子宫颈癌细胞株发挥很高的抑制活性;通过小鼠体内实验表明葶苈子对腹水癌有抑制作用。但有关南葶苈子在抑制人大肺癌细胞(NCI-H460)、乳腺癌细胞(SF-268)和胃癌细胞(SGC-7901)等方面未见报道。本实验分为两个部分:一、抗肿瘤活性的测定:南葶苈子的干燥粉末,经70%乙醇回流提取,提取物减压蒸馏后加水溶解,用石油醚和正丁醇依次萃取。分别得到乙醇提取物、石油醚提取物、正丁醇提取物。经水蒸汽蒸馏得到挥发油。其中对正丁醇提取物做进一步分离。通过MTT比色法测定以上各组分对NCI-H460、SF-268和SGC-7901肿瘤细胞体外生长的影响。二、南葶苈子3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因研究:实验表明南葶苈子及全草含较高的萜类物质(种子:14.727%;全草:22.89%)。植物体内萜类物质的合成与HMGR紧密相关。HMGR催化HMG-CoA向MVA转化,该酶是萜类物质合成的第一个关键酶,因而有着极高的研究价值。本实验借助RACE技术,对HMGR基因进行初步研究。实验结果如下:1.选用NCI-H460、SF-268和SGC-7901等3种肿瘤细胞,通过MTT比色法测定南葶苈子的乙醇、石油醚、正丁醇提取物和挥发油的抗肿瘤活性。浓度为100μg/mL时,乙醇提取物对NCI-H460肿瘤细胞抑制活性最强,达到78.10%;正丁醇提取物和挥发油对SF-268肿瘤细胞抑制活性最为明显,分别为76.27%和61.25%。2.南葶苈子的不同提取物对3种肿瘤细胞的抑制作用均表现出剂量依赖关系。依据回归方程计算出各提取物对NCI-H460、SF-268和SGC-7901肿瘤细胞的
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