基于水甘油通道蛋白理论探讨祛痰活血颗粒治疗NAFLD模型大鼠的作用机制

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目的:探索AQP-7,AQP-9在NAFLD模型大鼠肝脏和脂肪细胞中甘油转运通道作用,研究“祛痰活血颗粒”治疗NAFLD可能发挥的作用机制。方法:选用体重在190~250g健康雄性SD大鼠55只,适应性喂养1周后,按随机数字表法随机分为5组,分别为:正常对照组、模型对照组、中药低剂量组(6g/kg.d),中药中剂量组(12g/kg.d),中药高剂量组(16g/kg.d);除正常组给予普通饲料,其余4组均给予高脂饲料喂养,建立非酒精性脂肪肝大鼠模型;从第8周开始,每周从造模组随机抽取2只大鼠处死,取大鼠肝脏制作病理切片,观察其病理变化,确认造模成功后,按照以上分组给予中药干预,连续每日灌胃14d,21d,28d后,分三批处死大鼠,HE染色观察肝脏组织病理变化,Elisa测定肝功能(ALT、AST、GGT)和血脂(TC、TG),用Realtime-PCR检测大鼠肝脏AQP-9 m RNA和脂肪组织AQP-7m RNA的表达水平。结果:在整个实验期间,正常组的体重明显小于其他组,在第10周给予中药治疗后,模型组的体重增长率明显高于低、中、高剂量组,低、中、高剂量组之间,增长率差别不明显,差异无统计学意义(P>0.05);HE染色:模型组肝脏脂肪变性明显,与正常组比较有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低、中、高剂量组脂肪变性程度明显减轻(P<0.05);生化指标:与正常组比较,模型组血清AST、ALT、GGT、TC、TG均明显升高(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量组AST、ALT、GGT、TC、TG均有不同程度下降,差异有统计学意义(P<0.05),但均未恢复到正常水平,与正常组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);总体来讲:与低剂量组比较,中、高剂量组ALT,GGT下降更明显(P<0.05),中剂量组和高剂量组两者之间差异无统计学意义(P>0.05);与低、中剂量组,高剂量组AST、TC、TG下降更明显(P<0.05);与治疗14d和21d后相比较,治疗28d后大鼠血清AST、ALT、GGT、TC、TG下降更明显(P<0.05);Realtime-PCR结果显示:与正常组比较,模型组肝脏AQP9 m RNA表达量增高,脂肪组织AQP-7 m RNA表达量降低(P<0.05),与模型组比较,低、中、高剂量组肝脏AQP-9 m RNA表达量降低,脂肪组织AQP-7 m RNA表达量增高(P<0.05);结论:1.祛痰活血颗粒可以抑制NAFLD模型大鼠体重的增长率,不同程度降低NAFLD大鼠肝脏脂肪变性程度,恢复NAFLD大鼠的病理结构,其中中、高剂量组28d后的疗效最佳;2.祛痰活血颗粒可以改善NAFLD模型大鼠肝功酶学指标(包括ALT、AST、GGT),可以显著降低NAFLD大鼠模型的血清TG、TC水平,其中高剂量组28d后的疗效最佳;3.祛痰活血颗粒能够增加脂肪组织AQP-7 m RNA的表达水平和降低NAFLD模型大鼠肝脏AQP-9 m RNA的表达水平,使肝脏脂质代谢恢复平衡,从而减少甘油三酯在肝细胞中蓄积,提示抑制AQP-9的表达和促进AQP-7的表达可能是祛痰活血颗粒治疗NAFLD的作用机制之一。
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